HPLC хроматографија за анализа. Предмети: Високо ефикасна течна хроматографија на природни и отпадни загадувачи

Општ фармакопеја член.

Наместо уметност. ГФ XI.

Високо ефикасна течна хроматографија (течна хроматографија со висок притисок) е метод на хроматографија на колоната, во која мобилната фаза се служи со течност што се движи низ хроматографска колона исполнета со фиксна фаза (сорбент). Звучниците за високо ефикасна течна хроматографија се карактеризираат со висока хидраулична отпорност на влезот.

Во зависност од механизмот на одвојување на супстанциите, се разликуваат следните варијанти на високо ефикасна течна хроматографија: адсорпција, дистрибуција, јонска размена, ексклузивна, chiral, et al. Во согласност со природата на главните манифестирани интермолекуларни интеракции. Во адсовна хроматографија, поделбата на супстанциите се јавува поради нивната различна способност за ADSORB и се бореше од површината на сорбентата со развиена површина, на пример, силика гел. Во дистрибуцијата високо ефикасна течна хроматографија, сепарацијата се јавува поради разликата во коефициентите на дистрибуција на одделни супстанции помеѓу фиксни (по правило, хемиски претерано на површината на сѐ уште носачот) и подвижни фази.

Во зависност од видот на движењето и стационарната фаза, се разликуваат нормалната фаза и обратна фаза хроматографија. Во нормална фаза високо ефикасна течна хроматографија, стационарната фаза е поларна (најчесто силика гел или силика гел со NH 2 - или CN групи, итн.) И подвижната фаза е не-поларна (хексан или мешавина на хексан Со повеќе поларни органски растворувачи - хлороформ, алкохоли, итн.). Држењето супстанции расте со зголемување на нивниот поларитет. Во нормална фаза хроматографија, способноста за елуција на мобилната фаза се зголемува со растот на нејзиниот поларитет.

Во обратна фаза хроматографија, фиксна фаза - не-поларни (хидрофобни силика гелови со пресадена C4, C8, C18, итн.); Подвижната фаза е поларна (мешавина на вода и поларни растворувачи: ацетонитрил, метанол, тетрахидрофуран, итн.). Држењето супстанции расте со зголемување на нивната хидрофобност (не-поларитет). Колку е поголема содржината на органскиот растворувач, толку е поголема способноста за елекција на подвижната фаза.

Во јонската размена на хроматографијата на молекулата на супстанциите на смесата, дисоцијација во растворот на катјони и анјони, се одвоени при возење низ сорбент (катици или аннионит) поради различните интерактивни сили на дефинираните јони со јонски сорбент групи.

Во ексклузивна (сито, гел пенетрација, гел филтрација) хроматографија на молекула супстанции се одделени по големина поради нивната различна способност да навлезат во пулпата на стационарната фаза. Во исто време, првата од колоната е најголемата молекула способна да продира во минималниот број порти на фиксната фаза, а супстанциите со мали димензии на молекулите излегуваат.

Во хиралната хроматографија, оптички активните соединенија се одделени во индивидуални енантиомери. Поделбата може да се спроведе на фиксни фази на хиралните фиксни фази или на фиксни фази на Ahiral користејќи фази на движење на хирални.

Постојат и други опции за високо ефикасна течна хроматографија.

често сепарацијата не продолжува ниту еден по еден, туку според неколку механизми во исто време, во зависност од видот на мобилните и фиксните фази, како и природата на утврденото соединение.

Површина за апликација

Високо ефикасна течна хроматографија е успешно се користи и за висококвалитетна и квантитативна анализа на лекови во тестот "автентичност", "надворешни нечистотии", "распаѓање", "дозирање хомогеност", "квантитативна дефиниција". Треба да се напомене дека хроматографијата ви овозможува да комбинирате неколку тестови во едно испитување, вклучувајќи ја и "автентичноста" и "квантитативна дефиниција".

Опрема

За анализа, се користат соодветни уреди - течни хроматографи.

Составот на течниот хроматограф обично ги вклучува следните главни јазли:

- јазол на подготовката на мобилната фаза, вклучувајќи контејнер со подвижна фаза (или контејнер со индивидуални растворувачи вклучени во мобилната фаза) и системот за дегасирање на подвижната фаза;

- систем за транспорт;

- Миксер на мобилната фаза (доколку е потребно);

- Примерок влез систем (инјектор), може да биде рачен или автоматски (Autosampler);

- хроматографска колона (може да се инсталира во термостатот);

- детектор (еден или повеќе со различни начини на откривање);

- Систем за контрола на хроматограф, систем за собирање податоци и преработка.

Покрај тоа, хроматографот може да вклучува: систем за подготовка на примерок и реактор за превземање, систем за преклопување на звучници, реактор за собирање на пост-собирање и друга опрема.

Систем за пумпа

Пумпите обезбедуваат проток на подвижната фаза во колоната со одредена брзина. Составот на мобилната фаза и протокот може да биде трајно или менување за време на анализата. Во случај на постојан состав на мобилната фаза, процесот се нарекува изократски, а во вториот градиент. Современиот систем за пумпање на течниот хроматограф се состои од една или повеќе пумпи управувани од компјутер. Ова ви овозможува да го промените составот на мобилната фаза според одредена програма во градиент. Пумпи за аналитичка високо ефикасна течна хроматографија ви овозможуваат да ја задржите протокот на мобилната фаза во колоната во опсегот од 0.1 до 10 ml / мин со притисок на влезот во колоната до 40 MPa. Пулсациите на притисокот се минимизираат со специјални системи за амортизација вклучени во дизајнот на пумпите. Работните делови на пумпите се направени од материјали отпорни на корозија, што овозможува користење на агресивни компоненти како дел од подвижната фаза.

Миксери

Во миксер, формирање на единствена мобилна фаза од индивидуални растворувачи испорачани со пумпи, ако неопходната смеса не е подготвена однапред. Компонентите за мешање на мобилната фаза во миксер може да се појават и со низок притисок (на пумпите) и при висок притисок (по пумпи). Миксерот може да се користи за подготовка на подвижната фаза и со изобилно елуција.

Обемот на миксер може да влијае на времето на одржување на компонентите за време на градиент.

Инјектори

Инјекторите можат да бидат универзални, со можност за промена на волуменот на примерокот, или дискретно да го внесете примерокот само одреден износ. Двата вида на инјектори можат да бидат автоматски ("автокументи" или "autosamplers"). Инјекторот за вметнување на примерокот (раствор) се наоѓа директно пред хроматографската колона. Дизајнот на инјектирање ви овозможува да ја промените насоката на протокот на мобилната фаза и да го воведете примерокот во диспензерот за јамка на одреден волумен (обично од 10 до 100 μl) или во специјален уред за дозирање на наизменичен волумен. Обемот на јамката е индициран на неговото обележување. Дизајнот на дискретен инјектор, по правило, овозможува замена на јамката. Модерни автоматски инјектори може да имаат голем број на дополнителни функции, на пример, за извршување на функцијата за подготовка на примерокот: да ги измешаат и разредат примероците, за да ја спроведат реакцијата на деривати на претхомилум.

Хроматографска колона

Хроматографските столбови се обично цевки од нерѓосувачки челик, стакло или пластика исполнети со сорбент и се затворени на двете страни со филтри со дијаметар од пори од 2-5 микрони. Должината на аналитичката колона може да биде во опсег од 5 до 60 см и повеќе, внатрешниот дијаметар е од 2 до 10 mm. Колоните со внатрешен дијаметар помала од 2 мм се користат во хроматографија со микроколони. Исто така, постојат капиларни колони со внатрешен дијаметар од околу 0,3-0,7 мм. Колоните за препаративна хроматографија може да имаат внатрешен дијаметар од 50 mm и повеќе.

Кратка колона (прекомостува) кои вршат различни помошни функции можат да се инсталираат пред аналитичката колона, кои главно се заштитени со аналитичката колона. Вообичаено, анализата се изведува на собна температура, сепак, за зголемување на ефикасноста на поделбата и намалување на времетраењето на анализата, термостатизацијата на колоните на температури до 80 е 100 ° C може да се користи. Можноста за користење на покачена температура за време на поделбата е ограничена со стабилноста на фиксната фаза, бидејќи при покачени температури е можно неговото уништување е можно.

Фиксна фаза (сорбент)

Бидејќи сорбети обично се применуваат:

силика гел, алуминиум оксид, кој се користи во нормална фаза хроматографија. Механизмот за одржување во овој случај е обично адсорпција;
силика гел, смола или полимери со пресадена киселина или главни групи. Опсег - јонска размена и јонска хроматографија;
силика гел или полимери со предодредена дистрибуција на големина на пораз (ексклузивна хроматографија);
хемиски модифицирани сорбенти (сорбенти со фази на калемење), најчесто се подготвуваат врз основа на силика гел. Холдинг механизам - адсорпција или дистрибуција помеѓу подвижни и фиксни фази. Обемот зависи од видот на функционалните групи на графт. Некои видови на сорбенси може да се користат и во конвертирање и нормално фаза хроматографија;
хемиски модифицирани хирални сорбенти, на пример, деривати на целулоза и амилозни, протеини и пептиди, циклодекстрини, хитозани кои се користат за одвојување на енантиомери (хирална хроматографија).

Сортанти со лепливи фази може да имаат различен степен на хемиска модификација. Како фази на графт, најчесто се применува:

- октодецил групи (octadecylsilane sorbent (ODS) или од 18);

- октални групи (сорбенца octylsilane или од 8);

- фенилни групи (сорбент фенилсилане);

- цианопропил групи (CN sorbent);

- аминопропил групи (сорбент NH 2);

- ДИОЛ ГРУПИ (СОРБЕНТ ДИОЛ).

Најчесто, анализата се врши на фази на не-поларни пресадени во режим на фаза на обратен фазен со помош на сорбент од 18 години.

Сортанти со пресадени фази добиени врз основа на силика гел се хемиски стабилни во pH вредности од 2,0 до 7,0, освен ако не е поинаку определено од страна на производителот. Сорбен честички може да има сферична или неправилна форма и разновидност на порозност. Големината на сорбетните честички во аналитичката високо ефикасна течна хроматографија обично е 3-10 микрони, во подготовна високо ефикасна течна хроматографија - 50 μm и многу повеќе. Исто така постојат и монолитни столбови во кои сорбент е монолит преку пори кои го исполнуваат целиот волумен на колоната.

Високата ефикасност на поделбата е обезбедена од високата површина на честичките на сорбент (што е последица на нивната микроскопска големина и присуството на пори), како и униформноста на составот на сорбентата и густата и униформа Пакување.

Детектори

Во високо ефикасна течна хроматографија, се користат различни методи за откривање. Општо земено, подвижната фаза со компонентите растворени во неа по хроматографската колона спаѓа во ќелијата на детекторот, каде што континуирано се мери со сопствениот имот (апсорпција во ултравиолетовиот или видлив регион на спектарот, флуоресценција, рефрактивен индекс, електрична спроводливост итн.). Нарачниот хроматограм е графикон на зависноста на некој физички или физичко-хемиски параметар на фазата на движење.

Најчестите детектори во високо ефикасна течна хроматографија се спектрофотометриски. Во процесот на елуција во специјално дизајниран микроцеб, оптичката густина на елуатот се мери со предодредена бранова должина. Широката линија на линеарност на детекторот ви овозможува да ги анализирате и нечистотиите и главните компоненти на смесата на еден хроматограм. Спектрометометрискиот детектор овозможува откривање на било која бранова должина во својот работен опсег (како по правило, 190-600 nm). Оптекторите на мултиволнички детектори, исто така, се применуваат за да се спроведе откривање со неколку бранови должини во исто време и детектори на диоди матрица, овозможувајќи да се регистрира оптичката густина во исто време во целиот работен опсег на бранови должини (обично 190-950 nm). Ова ви овозможува да го регистрирате апсорпционата спектра која поминува низ клетката на компонентата.

Флуориметрискиот детектор се користи за одредување на флуоресцентни соединенија или не-флуоресцентни соединенија во нивните флуоресцентни деривати. Принципот на работа на флуориметрискиот детектор се заснова на мерење на флуоресцентното зрачење на апсорбираната светлина. Апсорпцијата обично се изведува во ултравиолетовиот регион на спектарот, брановата должина на флуоресцентното зрачење ги надминува брановите должини на апсорбираната светлина. Флуориметриските детектори имаат многу висока чувствителност и селективност. Сензитивноста на флуоресцентни детектори е околу 1000 пати повисока од спектрофотометриската чувствителност. Модерните флуоресцентни детектори дозволуваат не само да се добијат хроматограми, туку и да го регистрираат спектарот на возбудата и флуоресценцијата на анализираните соединенија.

За да се одредат соединенија, слабо апсорбираат во ултравиолетови и видливи области на спектарот (на пример, јаглени хидрати), употреба рефрактометриски Детектори (рефрактори). Недостатоците на овие детектори се ниски (во споредба со спектрофотометриските детектори) чувствителност и значителна температура зависност од интензитетот на сигналот (детекторот треба да биде термостат), како и неможноста да ги користат во режимот на изработка на градиент.

Принцип на работа детектори за расфрлање на испарувачки ласерски светлинасе заснова на разликите во притисокот на пареата на хроматографските растворувачи кои се дел од фазата на движење, како и анализираните супстанции. Фазата на движење на излезот на колоната е воведена во распрскувачот, измешана со азот или CO 2 и во форма на парична казна аеросол влегува во загреаната испарлива цевка со температура од 30-160 ° C, во која мобилната фаза испарува . Аеросолот на не-испарливи честички на анализираните супстанции го отстранува светлината во комората за дисперзија. Според степенот на дисперзија на светлината, може да се суди бројот на дефинираното соединение. Детекторот е посензитивен од рефрактометрискиот, неговиот сигнал не зависи од оптичките својства на примерокот, за видот на функционалните групи во определените супстанции, на составот на мобилната фаза и може да се користи во режимот на изработка на градиент.

Електрохемиски детектори (конвертиметриски, ампериметриски, кулометриски, итн.). Ампериметрискиот детектор се користи за одредување на електрични врски кои можат да бидат оксидирани или обновени на површината на цврстата електрода. Аналитички сигнал е износот на оксидационата струја или обновување. Во ќелијата на детекторот има најмалку две електроди - работна и електродна споредба (откривање на хлорид или челик). Електричниот потенцијал се применува на електродите, чија вредност зависи од природата на дефинираните соединенија. Мерењата може да се вршат и со постојан потенцијал и во пулсен режим, кога профилот на менување на потенцијалот на работната електрода е наведен за време на еден циклус на сигнал регистар. Амперискиот детектор користи работни електроди од јаглеродни материјали (најчесто стаклен јаглерод или графит), а метал: платина, злато, бакар, никел.

Специјаметрискиот детектор се користи за откривање на анјони и катјони во јонска хроматографија. Принципот на неговата работа се заснова на мерење на електричната спроводливост на подвижната фаза за време на процесот на елуција.

Исклучително информативниот е масовен спектрометриски детектор, кој има висока чувствителност и селективност. Најновите модели на масовни спектрометри за течна хроматографија работат во масата M / Z од 20 до 4000 A.M.

Во високо ефикасна течна хроматографија, исто така се користат Fiier-IR детектори, радиоактивност и други други.

Систем за собирање и обработка на податоци

Модерен систем за обработка на податоци е компирен компјутер со хроматограф со инсталиран софтвер кој ви овозможува да го регистрирате и обработувате хроматограмот, како и да ја контролирате работата на хроматографите и да ги следите главните параметри на хроматографскиот систем.

Мобилна фаза

Мобилната фаза во високо ефикасна течна хроматографија врши двојна функција: обезбедува пренос на ужасните молекули на колоната и ги прилагодува рамнотежата константи и, според тоа, ја задржува интеракцијата со фиксната фаза (со скрубана на површината) и со молекули на одделни супстанции. Така, менувањето на составот на мобилната фаза во високо ефикасна течна хроматографија може да биде под влијание на времето на задржување на соединенија, селективност и ефикасност на нивното одвојување.

Мобилната фаза може да се состои од еден солвент, често од два, доколку е потребно, од три или повеќе. Составот на мобилната фаза го означува волуметрискиот сооднос на растворувачите вклучени во него. Во некои случаи, може да се наведе масовниот сооднос, кој треба конкретно да се предвиди. А тампон решенија со одредена pH вредност, разни соли, киселини и бази и други модификатори може да се користи како компоненти на подвижната фаза.

Во нормална фаза хроматографија обично се користат течни јаглеводороди (хексан, циклохексан, хептане) и други релативно не-поларни растворувачи со мали адитиви; органски соединенијакои ја прилагодуваат елитната моќ на мобилната фаза.

Во обратна фаза хроматографија како мобилна фаза, се користи вода или вода органски мешавини. Органските адитиви обично се служат од поларните органски растворувачи (ацетонитрил и метанол). За да се оптимизира раздвојувањето, водени решенија може да се користат со одредена pH вредност, особено тампон раствор, како и разни адитиви во подвижната фаза: фосфор и оцетни киселини во одвојување на кисели соединенија; Амонијак и алифатични амини во поделбата на главните соединенија и други модификатори.

Степенот на чистота на подвижната фаза е на хроматографска анализа, затоа е подобро да се користат растворувачи издадени специјално за течна хроматографија (вклучувајќи вода).

Кога користите УВ спектрофотометриски детектор, мобилната фаза не треба да има изречена апсорпција со избрана бранова должина за да се открие. Ограничувањето на транспарентноста или оптичката густина на одредена бранова должина на растворувачот на одреден производител често се означува на пакетот.

Мобилната фаза и анализираните решенија не треба да содржат нерастворливи честички и гас меурчиња. Водата добиена во лабораториски услови, водени решенија, пред-измешани со вода органски растворувачи, како и анализирани решенија, мора да бидат подложени на тенка филтрација и дегазирање. За овие цели, филтрирањето под вакуум се користи преку инертен во однос на овој растворувач или раствор на мембрански филтер со големина од пори од 0,45 μm

Листа на услови за хроматографија што треба да се специфицираат

Статијата на фармакопејјата треба да се даде: целото комерцијално име на колоната што укажува на бројот на производителот и каталогот, големината на колоната (должина и внатрешен дијаметар), како што е сорбент, што укажува на големина на честички, големина на пораст, температурата на Колона (ако е неопходно термостатирање), волуменот на примерокот воведе (волуменски јамки), составот на мобилната фаза и начинот на нејзината подготовка, брзината на хранење на мобилната фаза, видот на детекторот и условите за откривање (ако Потребни, параметрите на детекторот на детекторот), опис на режимот на градиент (ако се користат), кој ја вклучува фазата на обновување на основните услови, време на хроматографија, детален опис на методологијата и формулата за пресметување, опишувајќи го Подготовка на стандардни и тест решенија.

Во случај на употреба на предрасуди деривати во Autosampleplate, се дадени информации за програмата за работа на Autosampler. Во случај на употреба на деривати по собирање, стапката на добиточна храна на дериватизирачкиот реагенс е индицирана, обемот на мешање на јамката и неговата температура.

Модифицирани видови на високо ефикасна течна хроматографија

Јонска поврзана хроматографија

Еден од видовите на нацртана фаза високо ефикасна течна хроматографија е јон на пар хроматографија - овозможувајќи да се утврдат јонизираните соединенија. За да го направите ова, хидрофобни органски соединенија со јонски групи (јонски спарени реагенси) се додаваат во традиционалната фаза-фаза со високи перформанси течна хроматографија на мобилната фаза. За одвојување на базите, натриум алкил сулфити обично се користат за одвојување на киселина, тетралкиламониум соли (фосфатен тетрабутиламониум, центитилметиламониум бромид итн.) Се користат за одвојување на киселина. Во режимот поврзан со јонски, селективноста на поделбата на не-јонските компоненти ќе биде ограничена на механизмот за задржување на обратна фаза, а задржувањето на основите и киселините значително се зголемува, додека формата на хроматографски врвови е подобрена.

Холдинг во режим поврзан со јонски е предизвикан од сосема сложени рамнотежни процеси кои се натпреваруваат меѓу себе. Од една страна, поради хидрофобни интеракции и ефектот на поместување на поларниот медиум на мобилната фаза, сорпцијата е можна хидрофобни јони на површината на алкилсилицата на таков начин што наелектризираните групи се третираат во фазата на движење. Во овој случај, површината стекнува својства за размена на јони и задржувањето е предмет на законите на јонската размена на хроматографија. Од друга страна, формирањето на еден јонски пар е можно директно во степенот на елуент, по што следи нејзиниот сорбент на сорбент според фазниот механизам.

Хидрофилна интеракција хроматографија ( Хилиќ. Хроматографија)

Хидрофилната интеракција хроматографија се користи за одделување на поларни соединенија, слабо се одржува во високо-ефикасна течна хроматографија со обратна фаза. Како мобилна фаза во ова олицетворение, се користат мешавини на вода-ацетонитрил со додавање на соли, киселини или бази. Фиксни фази, по правило, се силика гелови модифицирани од поларните групи (амино, диол, цианопропил групи итн.). Повеќе поларни врски се чуваат посилни. Електричната способност на мобилната фаза се зголемува со зголемување на поларитетот.

Јонска размена и јонска висока ефикасна течна хроматографија

Јонска размена на хроматографија се користи за анализа на органски (хетероциклични основи, аминокиселини, протеини итн.) И неоргански (различни катјони и аниции) соединенија. Поделбата на компонентите на анализираната мешавина во јонска размена на хроматографија се базира на реверзибилна интеракција на јите на анализираните супстанции со јонските разменувачки групи на Збор. Овие сорбети се главно или полимерни јонски смоли (обично кополимери на стирен и дивинилбензен со степени јонски групи за размена), или силика гелови со пресадена јонска размена на групи. Сортени со групи: -NH 3 +, -R3 N +, -R2 HN +, -RH2 N +, итн се користат за одделување на анјони (анјони) и сорбенти со групи: -SO 3 -, -RSO 3 -, -сон, -По 3 - и други. За поделбата на катјони (катјони).

Како мобилна фаза во јонска размена хроматографија, се користат водени раствори на киселини, бази и соли. Обично ги користите тампон решенијата кои ви дозволуваат да одржувате одредени вредности на pH. Исто така е можно да се користат мали додатоци на органски растворувачи мешање со вода - ацетонитрил, метанол, етанол, тетрахидрофуран.

Јонска хроматографија - варијанта на јонска размена на хроматографија, која користи детектометриски детектор на диригент за откривање на утврдените соединенија (јони). За високо чувствително определување на промените во електричната спроводливост што поминува низ подвижниот фазен детектор, електричната спроводливост на позадината на мобилната фаза треба да биде ниска.

Постојат две главни варијанти на јонска хроматографија.

Првиот од нив е двопопуларна јонска хроматографија, врз основа на сузбивање на електричната спроводливост на електролитот на подвижната фаза со користење на втора јонска размена на колона или специјален систем за потиснување на мембраната лоциран помеѓу аналитичката колона и детекторот. Кога поминува низ системот, електричната спроводливост на мобилната фаза е намалена.

Втората верзија на јонска хроматографија е една колона јонска хроматографија. Во ова олицетворение се користи подвижната фаза со многу ниска електрична спроводливост. Како електролити, широко се користат слаби органски киселини: бензоични, салицилили или изофирт.

Ексклузивна течна хроматографија со висока ефикасност

Ексклузивна хроматографија (гел хроматографија) е посебно олицетворение на високо ефикасна течна хроматографија врз основа на одвојување на молекулите според нивната големина. Дистрибуцијата на молекулите помеѓу фиксните и подвижни фази се базира на големини на молекули и делумно на нивната форма и поларитет.

Постојат два линиски типови на интеракција на молекули со порозна фиксна фаза. Молекулите со димензии кои го надминуваат максималниот дијаметар на порите генерално не се одржуваат и елиминираат истовремено со подвижната фаза. Молекулите со димензии помали од минималниот дијаметар на порите на сорбентата се слободно навлезени во порите и е изласнат од колоната. Останатите молекули кои имаат средни димензии се одржуваат делумно и за време на елината се поделени во фракции во согласност со нивните големини и, делумно, формата навлегува во порите на сорбентата, во зависност од големината и делумно во зависност од неговата форма. Како резултат на тоа, супстанцијата е изласна со различни времиња за задржување.

Јонокаксонска хроматографија

Во срцето на механичарот IonexScaluzion хроматографија е ефект, како резултат на кој соединенијата во јонизирана форма не се чуваат на разменувач на сорбентен јонски, додека соединенијата во молекуларната форма се дистрибуираат помеѓу фиксните и водени фази во порите на јонска размена сорбент и подвижната фаза мигрираат во просторот помеѓу честичките на сорбент. Поделбата се базира на електростатско одбивање, поларни и хидрофобни интеракции помеѓу растворените соединенија и сорбента.

Антионични групи на површината на сорбент делуваат како полупропустлива "мембрана" помеѓу стационарни и мобилни фази. Негативно наелектризираните компоненти не стигнуваат до стационарната мобилна фаза, бидејќи тие се одбиени со истото име на обвинетите функционални групи и елуирани во "мртов" (слободен) волумен на колоната. Компонентите во молекуларната форма не се "отфрлени" од страна на катјон-размена сорбента и се дистрибуираат помеѓу стационарни и мобилни фази. Разликата во степенот на задржување на не-јонските компоненти на смесата е диктирана од збир на поларни интеракции на не-јонски компоненти со функционални групи на катјон сорбен и хидрофобни интеракции на не-јонски компоненти со не-поларна марична матрица .

Хирална хроматографија

Целта на хиралната хроматографија е одвојување на оптички изомери. Поделбата се врши на фиксни фази на хиралните фиксни фази или на конвенционалните фиксни фази на Ahiral користејќи ги фазите на движење на хирални. Како фиксни фиксни фази, сорбети се користат со површината на модифицирани, групи или супстанции кои имаат хирални центри (хитозани, циклодекстрини, полисахариди, протеини итн. (Chiral Selectors). Истите фази може да се користат како фази што се движат како во овој случај. Нормална фаза или обратна фаза хроматографија. Кога се користи ахирални стационарни фази, хиралните модификатори се додаваат во подвижните фази: хирални метални комплекси, неутрални хирални лиганди, хирални и спарени реагенси итн.

Ултрафективна течна хроматографија

Ултрафиктивната течна хроматографија е варијанта на течна хроматографија, која се карактеризира со поголема ефикасност во споредба со класичната високо ефикасна течна хроматографија.

Карактеристика на ултрафективна течна хроматографија е употребата на сорбенти со големина на честички од 1,5 до 2 микрони. Димензиите на хроматографските столбови обично се движат од 50 до 150 mm во должина и од дијаметар од 1 до 4 mm. Обемот на инјектираниот примерок може да биде од 1 до 50 μl. Употребата на такви хроматографски столбови може значително да го намали времето за анализа и да ја зголеми ефикасноста на хроматографската сепарација. Сепак, додека притисокот на колоната може да достигне 80-120 MPA, потребната фреквенција на собирање на податоци од детекторот може да се зголеми на 40-100 hertz, волуменот за екстракција на хроматографскиот систем мора да се минимизира. Хроматографската опрема и столбовите што се користат во ултра-ефикасна течна хроматографија се специјално прилагодени за исполнување на барањата од овој тип на хроматографија.

Опремата наменета за ултра-ефикасна течна хроматографија, исто така, може да се користи во класична верзија на високо ефикасна течна хроматографија.

(претежно интермолекуларна) на границата на фазата дел. Како метод на анализа, HPLC е дел од група методи, кои, со оглед на сложеноста на предметите кои се студираат, вклучува прелиминарна поделба на почетната сложена мешавина на релативно едноставна. Потоа, добиени едноставни мешавини потоа се анализираат со конвенционални физички методи или специјални методи создадени за хроматографија.

Методот HPLC е широко користен во областите како што се хемијата, петрохемијата, биологијата, биотехнологијата, медицината, прехранбената индустрија, заштитата на животната средина, производство на лекови и многу други.

Според механизмот на поделба на анализирани или одвоени супстанции, HPLC е поделен на адсорпција, дистрибуција, јонска размена, ексклузивна, лиганска размена и други.

Треба да се има на ум дека во практична работа, поделбата честопати не е една по една, туку според неколку механизми во исто време. Така, сепарацијата за исклучување е комплицирана од адсорпционите ефекти, адсорпција - дистрибуција и обратно. Во исто време, повеќе разлики во супстанциите во примерокот според степенот на јонизација, основност или киселост, молекуларна тежина, Поларизибилност и други параметри, толку е поголема веројатноста за другите механизми за одвојување за такви супстанции.

Нормален фазен HPLC

Фиксната фаза е повеќе поларна, која е преовладува не-поларен растворувач во елуент:

Хексан: изопропанол \u003d 95: 5 (за ниско-поларни супстанции)
Хлороформ: Метанол \u003d 95: 5 (за средно-изолаторни супстанции)
Хлороформ: Метанол \u003d 80:20 (за тешки поларни супстанции)

Соочувајќи се со фаза HPLC.

Фиксната фаза е помалку поларна, која е подвижна, затоа водата е речиси секогаш присутна во елуент. Во овој случај, секогаш можете да обезбедите целосна распуштање на басот во фазата на движење, речиси секогаш е можно да се користи UV откривање, скоро сите подвижни фази се меѓусебно измешани, можете да го користите Groundient Euttory, можете брзо да ја обновите колоната, можете брзо да ја обновите колоната, на Колоната може да се регенерира.

Конвенционалните елунси за HPLC со обратна фаза се:

Ацетонитрил: Вода
Метанол: вода
Изопропанол: Вода

Матрикс за HPLC.

Бидејќи се користат неоргански соединенија, како што се силициум оксид (силика гел) или алуминиум оксид, или органски полимери, како што се полистирен (вкрстено поврзување со дивинилбензен) или полиметакрилат. Силика гел, се разбира, во моментов е општо прифатена.

Главните карактеристики на матрицата:

Големина на честички (μm);
Големината на внатрешните пори (Å, Nm).

Добивање на силика гел за HPLC:

Калапи поликостерска киселина микросфери;
Сушење на честички на силика гел;
Воздушно одвојување.

Сорбен честички:

Редовни (сферични): отпорност на повисок притисок, повисока цена;
Не-руно: Пониски отпор на притисок.

Големината на Pore во HPLC е еден од најважните параметри. Колку е помала големината на пора, толку е полоша нивната пропустливост за молекулите на елумата. И затоа, полошо со сорпција капацитет на сорбенти. Колку е поголем порите, во прв пат, помалку, механичка стабилност на честичките на сорбент, и, второ, толку помалку површината на сорпција, затоа, полоша ефикасност.

Вакцинации на фиксна фаза

Нормална фаза HPLC:

Фиксна фаза со пропелна нитрилна вакцинација (нитрил);
Фиксна фаза со профиламинска вакцинација (амин).

Обратна фаза HPLC:

Фиксна фаза со алкил вакцинација;
Фиксна фаза со алкилсил вакцина.

Крај на ограничување - заштита на инспективирани сорбентни делови со дополнителна вакцинација "Мали" молекули. Хидрофобични крај-cepping (C1, C2): над селективноста, мокрење мокрење; Хидрофилна крај-cepping (Diol): под селективност, над веслото.

Детектори за HPLC.

УВ.
Диоди-матрица
Флуоресцентна
Електрохемиски.
Рефрактометриски
Масовно селективно

Линкови

Фондацијата Викимедија. 2010 година.

Гледајте што е "високо ефикасна течна хроматографија" во други речници:

високо ефикасна течна хроматографија - - [a.s.goldberg. Македонски руски енергетски речник. 2006] Теми Енергија како целина со високи перформанси течен хроматографија ... Технички престилни директориум

Терминот високо ефикасна течна хроматографија термин на англиски јазик со високи перформанси течна хроматографија Синоними на кратенки HPLC, амортизација поврзана со HPLC, олигопептид, протеомика, сорбент, целологија, ендоедарска, хроматографија ... ...

Течна хроматографија, во рој, да ја зголеми ефикасноста на поделбата на R Riper (елунт) под притисок (повеќе од 3x107 PA), пумпани низ колоните исполнети со сорбент со мали честички со дијаметар (до 1 μm) и Исто така, користете перфузија ... ... ...

Тог на хром, во фаза на рој, нестрентност (елуент) и фиксен. Сорбен, ТВ. Превозникот со течност или гел применет на неговата површина. Тие се изведуваат во колона исполнета со сорбент (колона хроматографија), на рамна ... ... Природна наука. Енциклопедиски речник

- [κρώμα (κρώμα) боја] Процесот врз основа на нееднаквата способност на индивидуалните компоненти на смесата (течни или гасовити) да се одржи на површината на адсорбентата, и кога ги апсорбира од превозникот и ... .. . Геолошка енциклопедија

- (од д-р. Грчки ... Википедија

Термин хроматографски мандат во англиска хроматографија Синоними за кратенки Поврзани термини Високо ефикасна течна хроматографија, Клаттрат, лабораторија на чип, порометрија, протеом, протеомика, сорбент, ензим, Fullerene, Endoehedral ... ... ... Енциклопедиски речник нанотехнологија

Течна хроматографија врз основа на сплит. Способноста на споделени јони на јонска размена со Fixir. сорбетни јони формирани од дисоцијација на јонски групи на вториот. За поделба на катјони, катлите се користат за ... ... ... Хемиска енциклопедија

HPLC. - Високо ефикасна течна хроматографија ... Речник на кратенки на рускиот јазик

Високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) е еден од ефективните методи за одвојување комплексни мешавини на супстанции, широко користени и во аналитичката хемија и во хемиската технологија. Основата на хроматографската сепарација е да учествува ... Википедија

Книги

Практична високо ефикасна течна хроматографија, Вероника Р. Мајер. Го презентираме читателот 5-то издание на книгата, која е проширена од модерни методи и опрема. Во книгата многу префинетост и додаде голем број на врски. Оние места во текстот каде ...

Течна хроматографија

Течна хроматографија - Ова е вид на хроматографија во која подвижна фазанаречен елуент е течност. Фиксна фаза можеби цврст сорбент, цврст носач со течност применета на неговата површина или гел..

Разликуваат колона и. тенок слој Течна хроматографија. Во варијантата на колоната низ колоната исполнета со фиксна фаза, делот од раздвоената мешавина на супстанции во елуентниот тек, кој се движи под притисок или под дејство на гравитацијата. Во тенкослојната хроматографија, елуент се движи под дејство на капиларни сили долж рамниот слој на сорбентата што се применува на стаклената плоча или металната фолија, по порозниот полимер филм или од лента на специјална хроматографска хартија. Методот на течно-слоеви течна хроматографија под притисок беше развиен кога елуент се пумпа преку слој на сорбент, сендвич помеѓу плочите.

Постојат такви видови на течна хроматографија како аналитички(за анализа на мешавини на супстанции) и подготовки (За да ги нагласи чистите компоненти).

Разликуваат течна хроматографија (Лукс) Во својата класична верзија, спроведена во атмосферски притисок, I. голема брзина) извршени во зголемен притисок. Во високо ефикасна течна хроматографија (HPLC), се користат колони со дијаметар од до 5 мм, цврсто спакувани со сорбент со мали честички (3-10 μm). За да пумпате елуент низ колоната, применувајте го притисокот на 3,107 PA. Овој тип на хроматографија се нарекува хроматографија со висок притисок. Преминувањето на елуент преку колона со висок притисок овозможува драматично да ја зголеми стапката на анализа и значително да ја зголеми ефикасноста на поделбата со користење на парична казна сорбента.

Опции на VPLC се микроколонска хроматографија на сорбентни колони со мал дијаметар и капиларна хроматографија На шупливи и исполнети со сорбент капиларни колони. Методот HPLC моментално овозможува да се идентификуваат, квантитативно анализираат комплексни мешавини на органски соединенија.

Течната хроматографија е најважна физички-хемиски метод Истражување во хемија, биологија, биохемија, медицина, биотехнологија. Се користи за:

· Проучување на метаболичките процеси во живите организми на лекови;

· Дијагностика во медицината;

· Анализа на производи од хемиска и петрохемиска синтеза, посредници, бои, горива, мазива, нафта, отпадни води;

· Студии за сорпции изотерми од раствор, кинетика и селективност на хемиски процеси;

· Избор

· Анализа и поделба на мешавини, нивно прочистување и одвојување на многу биолошки супстанции, како што се аминокиселини, протеини, ензими, вируси, нуклеински киселини, јаглени хидрати, липиди, хормони.

Во хемијата на високи молекуларни соединенија и во производството на полимери со користење на течна хроматографија, квалитетот на мономерите ја анализираат дистрибуцијата и дистрибуцијата на молекуларна тежина од страна на видовите на функционалност на олигомери и полимери, што е неопходно за контрола на производите.

Течната хроматографија исто така се користи во парфимерија, прехранбена индустрија, за анализа на загадувањето на животната средина, во судска медицина.

Методот на високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) беше развиен и имплементиран во средината на 70-тите години на XX век. Потоа се појавија првите течни хроматографи.

Течната хроматографија е оптимален метод за анализа на хемиски и термички нестабилни молекули, високи молекуларни тежински супстанции со намалена нестабилност. Ова може да се објасни со посебна улога на мобилната фаза во Лукс, за разлика од гасна хроматографија: елуентот не само што ја спроведува транспортната функција.

2. Основни концепти и класификација на методи на течна хроматографија.

Од механизмот за одржување на одделни супстанции со фиксна фаза Круг Разликува:

седиментарна хроматографија

· адсорпција хроматографија , во која се одредува поделбата како резултат на интеракцијата на споделената супстанција adsorbent., како што е алуминиум или силика гел оксид, има на површината активни поларнски центри. Растворувач (елуент) - не-поларна течност.

Сл. Шема на одвојување на мешавината на супстанции со адсорпција хроматографија

http: // www. Xumuk. Ru / biologhim / bio / img014.jpg

Механизмот за сорпција се состои во специфична интеракција помеѓу поларната површина на сорбент и поларни (или способни за поларизирани) локации на молекулите на анализираната компонента (Слика). Интеракцијата се јавува поради интеракцијата на донатори или формирање на водород обврзници.

Сл. Дијаграм на адсорпција течна хроматографија

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image006_11.jpg "Ширина \u003d" 219 "висина \u003d" 200 "\u003e

Сл. . Дистрибутивна хроматографија со фаза на графт (нормална фаза опција).

http: // www. Chemnet. Ru / rus / настава / масло / spezprakt-chr. HTML.

Зашто нормално фаза Варијанта на дистрибутивната хроматографија како супституирани алкил хлоросилани, кои содржат поларни групи, како што се нитрил, амино група итн. (Слика), се користат како модификатори на површината на површината на силика гел (фази на графт). Употребата на фасани фази овозможува фино контрола на сорпција својства на површината на стационарната фаза и да се постигне висока ефикасност на поделба.

Фаза на соочување Течната хроматографија се заснова на распределбата на компонентите на мешавината помеѓу поларните елуентни и не-поларните групи (долги алкилски синџири), пресадена на површината на сорбентата (Слика). Помалку е веројатно дека ќе користи варијанта на течна хроматографија со применети фази, кога течната фиксна фаза се применува на фиксен превозник.

Сл. . Дистрибутивна хроматографија со фаза на пресадена фаза (опција за обратна фаза). http: // www. Chemnet. Ru / rus / настава / масло / spezprakt-chr. HTML.

За дистрибуција на флота за дистрибуција се однесува и екстракција течност. хроматографија, во која фиксна фаза е органски екстрафатран применет на цврст носач, и подвижен воден раствор на заеднички соединенија. На пример, фенолите, текстуалните фосфати, амино, кватернерни амониумски бази, како и фосфаузи кои содржат сулфур се користат како екстрактанти. Екстракција течна хроматографија се користи за одвојување и концентрација на неоргански соединенија, на пример, алкални метални јони, актиноиди итн. Се блиску до својствата на елементите, во процесите на обработка на потрошеното нуклеарно гориво.

јонска размена на хроматографија,

јонски.

kationites

Анјонски.

амфотерни јонии

Амфолити

Јоонит

Kationit.

Анионити

R-H + NA + + CL - → R-NA + H + + CL - (катјонска размена)

R-OH + NA + + SL - → R-SL + NA + + OH - (Anion Exchange)

Ionies мора да ги исполнуваат следниве услови: да бидат хемиски отпорни во различни средини, механички издржливи во суви и особено во отечена состојба, имаат голем капацитет на апсорпција и способност да се регенерира добро.

Во јонска размена (јонска) хроматографија, одделени анјони (катјони) се откриени во форма на киселини (соодветни основи) со високо чувствителен проводен детектор, каде што многу ефикасни колони се исполнети со сурфактантски јон со мал капацитет.

Јонска поврзана хроматографија

лиганд размена хроматографија

различни способности на споделени соединенија фалсификување на комплекси со транзициски метални катјони

ексклузивна хроматографија

разлики во големини на молекули

https://pandia.ru/Text/80/271/IMAGES/IMAGE009_7.jpg "Align \u003d" Право "Ширина \u003d" 429 "висина \u003d" 319 "\u003e

Сл. Шема за одржување на хроматографија за пенетрација на гел

афинарна хроматографија

Сл. Дијаграм на афината хроматографија

http: // www. Chemnet. Ru / rus / настава / масло / spezprakt-chr. HTML.

Потоа се отстранува од полимерот, поврзувањето на сложеното решение, кое има уште поголем афинитет за макромолекулата. Таквата хроматографија во биотехнологијата и биомедицината е особено ефикасна за распределба на ензими, протеини, хормони.

Во акција од начинот на движење на супстанцијата Се разликуваат следните варијанти на течна хроматографија: прирачник, фронталнои. секојдневен.
Најчесто се користи прирачник:варијанта во која се раздели смесата се администрира во колоната во елуентниот тек. Излезот на компонентите на мешавината од колоната е снимен на хроматограмот во форма на врвови. (Слика)

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image012_4.jpg "Ширина \u003d" 291 "висина \u003d" 165 "\u003e

Сл. Дијаграмот на развојната верзија на хроматографијата

Висина или квадратни врвови карактеризира концентрација на компоненти, но држи тома – квалитативен состав на мешавината. Идентификацијата на компонентите обично се врши совпаѓање на времето на задржување со стандардни супстанции, хемиски или физичко-хемиски методи, исто така, користат.

Зашто фронталнаолицетворение (Сл.) Преку колоната континуирано ја поминува мешавината на заеднички супстанции, која ја игра улогата на мобилната фаза. Како резултат на тоа, можно е да се добие само една супстанција која е помалку сносна во колоната.

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image014_2.jpg "Ширина \u003d" 279 "висина \u003d" 145 "\u003e

Сл. Фронтална верзија на хроматографија

Хроматограмот во овој случај ги претставува височините чии пропорционални со концентрациите на компонентите; Задржаните количини се определуваат од времето на одржување на компонентите. Во диференцијација на таков хроматограм, сликата се добива слична на онаа што се добива во опцијата за развој.

Внатре одел Олицетворение на компонентите на мешавината внесена во колоната се издава со елуент, кој е адсорбиран посилен од било која компонента. Како резултат на тоа, соседните фракции на одвоените супстанции се во непосредна близина на едни со други, редоследот на излезот на компонентата се одредува со моќта на интеракција со површината на сорбетниот (сл.).

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image016_3.jpg "Ширина \u003d" 320 "висина \u003d" 175 "\u003e

Сл. Шема на запечатување верзија на хроматографија

3. Главните хроматографски вредности и нивната дефиниција.

Во одвојувањето на супстанциите кои користат течна хроматографија, може да се користи, како што е наведено погоре, развојните, фронталните и секојдневните опции. Најчесто ја користат опцијата за развој, во која се воведува дел од раздвоена смеса во колоната во елуентскиот тек. Излезот на компонентите на мешавината од колоната е снимен на хроматограмот во форма на врвови. Од хроматограм (Сл.) Одреди:

Времето на задржување на не-конфигурирани (T0), одделени компоненти (TR1, TR2, TR3, итн.); Ширината на основите на врвовите (TW1, TW2, итн.).

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image018_12.gif "Ширина \u003d" 61 "висина \u003d" 24 src \u003d ";

б) поправена компонента ,

каде t "r -коригирано време за одржување на компонентата;

в) коефициент на капацитетот на колоната во однос на оваа компонента ;

г) ефикасност на колоната Карактеризиран бројот на еквивалентни теоретски плочи

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image022_8.gif "Ширина \u003d" 129 "висина \u003d" 51 SRC \u003d ";

ѓ) резолуцијаhttps://pandia.ru/Text/80/271/IMages/IMAGE024_9.gif "Ширина \u003d" 203 Висина \u003d 51 "висина \u003d" 51 "\u003e

Коефициент на капацитет к " има значително влијание врз големината Р.С: Кога се менува к."Од 0 до 10 (оптимални граници) Р.S во голема мера расте. Вредност к "утврдени од двојната површина на Збор и нејзиниот износ во колоната, како и константа на адсорпционата рамнотежа (Хенри константна).

Коефициент на селективност Се утврдува разликата во константите на адсорпционата рамнотежа од две одделени компоненти. Со зголемување на α (од 1 до ~ 5) Р.S значително се зголемува, со понатамошно зголемување на α  - Малку се менува. Селективноста на колоната зависи од факторите како што се хемиската структура на површината на сорбент, составот на елуентот, температурата на колоната и структурата на одвоените соединенија. Бидејќи сорпаноста на хроматографските супстанции во течна хроматографија се определува со парната интеракција на трите главни компоненти на системот - сорбент, одделени супстанции и елуент, промената на елуентскиот состав е пригоден начин за оптимизирање на процесот на одвојување.

Ефикасност на колоната Зависи од големината на честичките и структурата на порите на адсорбентата, од униформноста на колоната, елуент вискозност и стапката на масовна трансфер. Издолжувањето на колоната не секогаш води кон подобрување на одвојувањето, бидејќи отпорноста на колоната се зголемува, притисокот на елуентот на влезот и времето на искуство се зголемува, чувствителноста и точноста на анализата се намалува поради врвот од анализираната компонента. Ако, врвовите на две супстанции на хроматограмот се речиси целосно одделени. Со раст Р.S го зголемува времето за одвојување. Зашто Р.С. < 1 - Поделбата е незадоволително. Во подготовна хроматографија поради воведувањето на релативно големи количини на одделни супстанции, колоната работи со преоптоварување. Во овој случај, коефициентот на капацитетот е намален, висината се зголемува еквивалентно на теоретската плоча, што доведува до намалување на резолуцијата.

4. AdSorbents.

Хроматографската поделба на смесата ќе биде ефикасна ако адсорбентот и растворувачот (елуент) се правилно избрани.

Адсорбент не треба хемиски да комуницира со одвоените компоненти, да покаже каталитички ефект врз растворувачот. Исто така е неопходно адсорбентата да поседува селективност во однос на компонентите на смесата. Правилно избраниот адсорбентен мора да има максимален капацитет за апсорпција.

Разликуваат поларни (хидрофилни) и. не-поларни (хидрофобни) адсорбенти. Треба да се запомни дека адсорпцијата афинитет на поларните супстанции на поларните сорбенти е значително повисок од не-поларните.

Алуминиум оксид, активиран јаглерод, силика гел, зеолити, целулоза и некои минерали се користат како адсорбенти.

Алуминиум оксидАл2.О3. – amphoter AdSorbent.. (Слика) на неа може да се одвои со мешавини супстанции во поларните, па јас. во не-поларни растворувачи. Неутралниот алуминиум оксид се користи обично за хроматографија од не-водени раствори на екстремни јаглеводороди, алдехиди, алкохоли, феноли, кетони и етер.

Сл. Алуминиум оксид за хроматографија

http: // слики. /542857_w200_h200_product5.jpg.

Активноста на AL2O3 зависи од содржината на влагата во неа. Највисоката активност има бескорисен алуминиум оксид. Конвенционално се зема по единица. Доколку е потребно, можете да подготвите алуминиум оксид со различна содржина на влага со мешање на свежо подготвената алумина со вода (скршена скала).

Зависност од алуминиум оксид активност од содржина на влага

На пример, AL2O3 се користи за одвојување на јаглеводороди со 1,5-2 активност; За одвојување на алкохоли и кетони - 2-3.5.

Специфичен алуминиум оксид 230-380 м2 / g.

Силика гел (хидроксилирани или хемиски модифицирани) е сушениот желатинозен силициум диоксид, кој се добива од всадени решенија на силиконските киселини ( н.SiO2 · м.H2O) во PH\u003e 5-6. (Слика) цврст хидрофилен сорбент.

Сл. Силика гел

http: // www. Силика гел. /

http: // Силикагел. Ru / слики / ASKG. GIF.

Силика гел честички големината во аналитички колони 3-10 μm, во подготовка - 20-70 микрони. Големината на мали честички ја зголемува стапката на маса за пренос и ја зголемува ефикасноста на колоната. Модерните аналитички колони имаат должина од 10-25 см. Тие се исполнети со силика гел со големина на честички од 5 μm и овозможуваат одвојувачки комплексни мешавини од 20-30 компоненти. Кога големината на честичките ќе се намали на 3-5 микрони, ефективноста на колоната се зголемува, но исто така го зголемува отпорот. Значи, за да се постигне брзина на елуентен тек од 0,5-2,0 ml / мин, потребен е притисок (1-3) · 107pa. Силика гел издржува таков пад на притисок, гранулите на полимерните сорбенти се повеќе еластични и деформирани. Неодамна, механички издржливи полимерни сорбери на макроополозна структура со дебела мрежа се дизајнирани, кои во нивната изведба се приближуваат до силика гелови. Формата на србентните честички од 10 микрони и погоре немаат голем ефект врз ефикасноста на колоната, но се претпочитаат сфери на сферична форма, што дава попропустливо пакување. (Слика)

Сл. Силика гел сферична форма

http: // слики. / 6450630_w200_h200_silicalksmg. GIF.

http: //n6_2011/u7/silikagel-2.jpeg.

Внатрешната структура на силика гел честичка е систем на комуникациски канали. Се користат со течна хроматографија, сорбенти со дијаметар од 6-25 nm. Поделбата на течна хроматографија Б се изведува главно на силика гелови модифицирани со реакцијата на алкил и ариллоросиланите или алкилните етоксисилани со сироманални површински групи. Со помош на вакви реакции, групите C8H17-, C18H37- или C6H5- (за добивање на сорбенти со хидрофобизирана површина), нитрил, хидроксилни групи итн. (Слика)

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image033_0.jpg "Ширина \u003d" 166 "висина \u003d" 116 SRC \u003d "\u003e

Сл. Структура на модифицирани силика гел

Силика гел Се користи во хроматографија за одвојување на мешавини на нафтени производи, повисоко масни киселини, нивните естри, ароматични амини, произведени од нитро органски соединенија. Силика гел – хидрофилни сорбент, Лесно навлажнета со вода. Затоа, не може да се користи за сорција од водени раствори. Активноста на силика гел зависи од содржината на водата во неа: толку помалку вода во неа, толку е поголема активноста (скала на брокер).

Зависноста на активноста на силика гел од содржина на влага

Специфичната површина на силика гелови е 500-600 м2 / g.

Активирани јагленсе јаглеродна форма, која во процесот на обработка станува исклучително порозна и стекнува многу голема површина дизајнирана за адсорпција или хемиски реакции. (Слика) Тие имаат специфична површина 1300-1700 м2 / g.

Сл. Активиран јаглерод

http: // e-каталог. Русбиз. Ru / user_images / ru / prod_picture / 58035161249b9016f64372.jpg

Главниот ефект врз структурата на порите на активиран јаглен е почетните материјали за нивната подготовка. Активираните јаглен врз основа на кокосова школка се карактеризираат со поголема фракција на микропори (до 2 nm), врз основа на камен јаглен - поголема фракција на мезопоре (2-50 nm). Голем дел од макропоре е карактеристичен за дрвен активиран јаглен (повеќе од 50 nm). Микропорите се особено погодни за адсорпција на мали молекули и мезопори - за адсорпција на поголеми органски молекули.

Зеолити (молекуларни сита)- порозни кристални алуминозиликати на алкални и алкални земни метали на природно и синтетичко потекло. (Слика)

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image036_2.jpg "Ширина \u003d" 211 висина \u003d 211 "висина \u003d" 211 "\u003e

Сл. Зеолити

http: // www. Зеолит. SPB. ru / _img / _36mm. JPG.

http: // kntgroup. ru / thumb. php? File \u003d / Uploads / Produtts / 6.jpg & x_width \u003d 250

Четири видови на зеолити (A, X, Y, M) кои имаат различна кристална структура се познати. Во зависност од катјон на Зеолити, се нарекува: Ка, Наа, Камер, Накс, Кен, Кеј. Функција зеолити Дали е тоа порите на кристали имаат димензии од околу 0,4-1 nm, пропорционално со димензиите на молекулитемногу течни или гасовити супстанции. Ако молекулите на супстанции можат да навлезат во овие пори, тогаш адсорпцијата се јавува во порите на зеолитските кристали. Поголемите молекули на супстанции не се адсорбирани. Избор на зеолити со различни големини на пора, може јасно да се поделат мешавините од различни супстанции.

Специфичната површина на зеолити е 750-800 м2 / g.

При изборот на адсорбент, неопходно е да се земе предвид структурата на супстанциите и нивната растворливост. На пример, ограничувањето на јаглеводородите се adsorbed лошо, и незаситени (имаат двојни врски) - подобро. Функционалните групи ја зголемуваат способноста на супстанцијата на адсорпција.

5. Elutents.

При изборот на растворувач (елуент), неопходно е да се земе предвид природата на адсорбентата и својствата на супстанциите во раздвоената мешавина. Елунси мора да ги распушти сите компоненти на хроматографската мешавина, да имаат низок вискозитет, да го обезбедат потребното ниво на селективност, за да бидат евтини, нетоксични, инертни, компатибилни со методите за откривање (на пример, не можат да се користат со УВ детектор како елунт бензен).

Во нормална фаза хроматографија, јаглеводороди (хексан, хептан, изохакан, циклохексан) обично се користат со додавање на мали количини на CHCL3 хлороформ, ISO-пропанол ISO-C3H7ON, диизопропил етер; Во хроматографија со обратна фаза - мешавина од вода со CH3CN ацетонитрил, метанол CH3ON, етанол C2H5ON, диоксан, тетрахидрофуран, диметилформамид. За шиење индивидуални компоненти на мешавина одделена за време на хроматографијата, нивното секвенцијално перење често се изведува (елуција). За оваа намена се користат растворувачи со различни дезормациски способности. Растворувачите се ставаат во редоследот на способноста за несреќа во поларните адсорбенти - elotropic ред trappa.. Ако компонентите на споделената смеса имаат блиски вредности к "(коефициент на капацитетот на колоната во однос на оваа компонента), а потоа хроматографија од еден елуент. Ако индивидуалните компоненти на смесата се држат со тендер, користете серија на елументи со зголемена моќ.

Elotropic растворувачи

6. Опрема за течна хроматографија

Во модерната течна хроматографија, инструментите користат различни степени на сложеност - од повеќето едноставни системи до хроматографи висока класа.
Современиот течен хроматограф вклучува: елунтски тенкови, пумпи со висок притисок, диспензерот, хроматографската колона, детектор, уред за регистрација, систем за контрола и резултатите од математичката обработка.

На Сл. Блок дијаграм на течен хроматограф кој го содржи минималниот потребен сет на компоненти, во еден или друг, присутен во било кој хроматографски систем.

https://pandia.ru/Text/80/271/images/image038_2.jpg "Ширина \u003d" 361 "висина \u003d" 254 SRC \u003d "\u003e

Сл. Дијаграм на течен хроматограф: 1-резервоар за мобилната фаза, 2-пумпа, 3-инјектор, 4-колона, 5-термостат, 6-детектори, систем 7- Регистрирање систем, 8-компјутер.

Резервоар За мобилната фаза, мора да има доволен капацитет за анализирање и уред за растворувач од дегасиЗа да се елиминира формирањето во колоната и детекторите на меурчиња растворени во елуент на гасови.

Пумпадизајниран да се \u200b\u200bсоздаде постојан растворувач. Неговиот дизајн се одредува првенствено со работен притисок во системот. За да работат во опсегот од 10-500 MPa, се користат пумпи за тип на клип (шприц). Недостаток на нив е потребата за периодични запирања за да се пополни со елуент. За едноставни системи со ниски оперативни притисоци од 1-5 MPa, се користат евтини перисталтички пумпи. На елументите влегуваат во пумпата преку филтерот, одложувајќи ги честичките од прашина (повеќе од 0,2 микрони). Понекогаш се пренесува мала струја на хелиум преку елунси за отстранување на растворениот воздух и спречување на формирањето на меурчиња во детекторот (особено во случај на вода и поларни елументи). Во аналитички хроматографи за хранење елуент, клипните пумпи со фидбек систем се користат во колоната, што може да биде мазнење на протокот на 1-2% и да обезбеди рефус брзина од 0,1 до 25 ml / мин со притисок до до ~ 3.107 pa . Во микроколонската хроматографија, волуметриските брзини на елуантниот поток е значително помала - 10-1000 μl / мин. Во случај на изработка на градиент, се користат неколку пумпи, кои управуваат од програмерот и се внесуваат во комората за мешање 2-3 на елуентската компонента, оставајќи постојан вкупен проток. За воведувањето на примероци во колона со висок притисок, специјални микроспарни кранови се користат без прекин на протокот, поврзан со домаќин на познатиот волумен за решенијата во студијата. Системите за дозирање се развиени со автоматско селекција и примерок вовед со користење на микроседни кранови или шприцеви.

Инјектор Обезбедува внесување на примерок мешавина Споделени компоненти во колона со доволно висока репродуктивност. Едноставни системи за внесување на примероци - "Стоп-проток" Потребна е пумпа запре и, според тоа, помалку погодно од грабежните диспензери развиени од Reodyne.

Звучнициза HPLC, најчесто е направено од нерѓосувачки челик полиран цевка со должина од 10-25 см и внатрешен дијаметар од 3-5mm.

Сл. Хроматографски столбови за течна хроматографија

Користете исто така стаклени колониставен во метална обвивка; во микроколонска хроматографија - печатени метални колони со внатрешен дијаметар од 1,0-1,5mm, печатени стаклени микроколони Дијаметар 70-150 μm и шупливи капиларни колони Дијаметар 10-100 микрони; Во подготовна хроматографија - колони со дијаметар од 2 до 10 см и повеќе. За унифицирани и густи пополнување на колоните, сорбентата се користи со метод за пакување на суспензија. Суспензијата е подготвена од сорбент и соодветна органска течност, која се хранат под притисок до 5,107 ПА во колоната. За да се одредат одвоените компоненти кои излегуваат од колоната Користи детектори. Постојаност на температурата Обезбедено термостат.

Детектори За течна хроматографија, постојат проток Кјут во кој постои континуирано мерење на било кој имот на течењето елуент. Тие треба да бидат многу чувствителни. За да се зголеми чувствителноста на детекторот, понекогаш се користи за дериватизација на компонентите на мешавината по колоната. За ова, со протокот на елуент, ваквите реагенси се воведени, кои, во интеракција со одделени супстанции, на пример, деривати со поизразени својства се повеќе апсорбирани во УВ или видливиот регион на спектарот или имаат поголема флуоресцентна способност. Понекогаш дериватизацијата се изведува на хроматографска анализа и одделени деривати, а не почетни материјали. Најпопуларните типови детектори Општа намена се refractometersМерење индекс на рефракција, I. спектрофотометриски детекториДефинирање оптичка густина на растворувач На фиксна бранова должина (по правило, во ултравиолетовиот регион). ДО предности на рефрактортери (и недостатоци на спектрофотометри) треба да се припише ниска чувствителност на типот на дефинирани врскикои не можат да содржат хромофорски групи. Од друга страна, употребата на рефрактите е ограничена со изократски системи (со константен елуентен состав), така што употребата на растворувач градиент во овој случај не е можно.

Диференцијал "href \u003d" / Текст / Категорија / Различни / "rel \u003d" обележувач и рекордер. Исто така, достапност интеграторовозможувајќи ви да ги пресметате релативните области на добиените врвови. Во сложени хроматографски системи што се користат блок интерфејсПоврзување на хроматограф со персонален компјутеркој врши не само собирање и обработка на информации, туку и управува со инструментот, ги пресметува квантитативните карактеристики и, во некои случаи, квалитативниот состав на мешавините. Микропроцесор Обезбедува автоматско внесување на судење, промена од наведена програма за елуент Со издвојување на градиент, одржување температурна колона.

Брукер.Сл. Течен хроматограф Јаско.

Прашања за само-тест

Што е течна хроматографија? Наведете ги своите типови на употреба. Листа О.куче хроматографски вредности и нивните дефиниции Кои видови на течна хроматографија постојат во зависност од механизмот на одржување на одделени супстанции со фиксна фаза на лукс? Кои видови хроматографија постојат во зависност од начинот на движење на супстанцијата? Кои супстанции се користат како адсорбенти? Што е разликата? Што значи течна подвижна фаза - елуент? Барања за растворувачи. Која е разликата помеѓу дистрибутивната хроматографија од адсорпционата хроматографија? Наведете ги главните делови од течната хроматографска шема, нивната цел.

Листа на користени литератури

1 "течна хроматографија во медицината"

Http: // списание. ISSEP. RSSI. Ru / статии / pdf / 0011_035.pdf

2 "запознавање со методи на високо ефикасна течна хроматографија"

Http: // www. Chemnet. Ru / rus / настава / масло / spezprakt-chr. HTML.

3 "течна хроматографија"

Http: // е-наука. Ru / индекс /? Id \u003d 1540

4 "хроматографија"

Http: // belchem. Народ. Ru / хроматографија1.html.

Течна адсовна хроматографија на колона

Поделбата на мешавината на супстанции во колоната за адсорпција се јавува како резултат на разликите во нивното согласување во овој адсорбентен (во согласност со законот за замена на адсорпција утврдени со M. S. Color).

AdSorbents се порозни тела со силно развиена внатрешна површина, држејќи течности со интермолекуларни и површински феномени. Овие можат да бидат поларни и не-поларни неоргански и органски соединенија. Поларните адсорбенти вклучуваат силика гел (сушен желатинозен силициум диоксид), алуминиум оксид, калциум карбонат, целулоза, скроб, итн не-поларни сорбанти - активиран јаглерод, гумен прав и многу други синтетички патишта.

Следниве барања се презентирани на AdSorbents: S тие не треба да влегуваат во хемиски реакции со подвижна фаза и се одделни супстанции; S мора да има механичка сила; S Адсорбент зрна треба да биде иста дисперзија.

При изборот на условите за хроматографскиот процес, својствата на адсорбентните и адсорбирачките супстанции се земаат предвид.

Во класичното олицетворение на хроматографија со течна колона (домување и јавни комунални претпријатија) преку хроматографска колона, која претставува стаклена цевка со дијаметар од 0,5-5 см и должина од 20-100 см исполнета со сорбент (NF), елуент ( PF) е донесен. Елуентот се движи под влијание на гравитацијата. Брзината на нејзиното движење може да се прилагоди на дното на колоната со кран. Анализираната мешавина е поставена во горниот дел од колоната. Бидејќи се промовира примерокот, компонентите се одделени на колоната. По одредени интервали, фракциите на елуентот нагласени од елуентската колона се земаат, што се анализира со било кој метод, кој овозможува мерење на концентрациите на определените супстанции.

Колона адсорпција хроматографија во моментов се применува главно не како независен метод на анализа, но како метод на прелиминарна (понекогаш конечна) одвојување на комплексни мешавини за поедноставно, т.е. Да се \u200b\u200bподготви за анализа од други методи (вклучувајќи хроматографски). На пример, мешавина од токофероли е одвоена на колона со алуминиум оксид, е изложен елуентен и а-токоферол фракција се собира за следната определба со фотометрискиот метод.

Хроматографско одделување на мешавината на колоната поради бавниот напредок на ПФ трае многу време. За да се забрза хроматографскиот процес се изведува под притисок. Овој метод се нарекува високо ефикасна течна хроматографија (VZH)

Модернизацијата на опремата што се користи во класичната хроматографија со класична колона го направи еден од ветувачките и современите методи на анализа. Високо ефикасна течна хроматографија е пригоден начин на одвојување, подготовка распределба и спроведување на квалитативна и квантитативна анализа на не-испарливи термолабилни соединенија како мали, така и со голема молекуларна тежина.

Во зависност од видот на сорбентата што се користи во овој метод се користат 2 варијанти на хроматографија: на поларниот сорбент со користење на не-поларна елунт (опција за директна фаза) и на не-поларниот сорбент со поларната елунт - т.н. солидна фаза високо- Течна хроматографија за изведба (на LZHK).

Кога елуент транзиција кон елуент, рамнотежата под условите на теренот е воспоставена многу пати побрзо отколку во условите на поларните sorbengs и не-воден ПФ. Како последица на тоа, како и погодностите за работа со елумензи за вода и вода, OFVZH е добиен во моментов поголема популарност. Поголемиот дел од анализите се спроведуваат со помош на АРС.

Опрема за GZH.

Поставувањето на современа опрема за VZH, по правило, се состои од две пумпи 3.4 (Слика 7.1.1.1), контролиран од микропроцесорот 5, а елуент се хранат со одредена програма. Пумпите создаваат притисок до 40 MPa. Примерокот се внесува преку специјален уред (инјектор) 7 директно во елуент. По поминување низ хроматографската колона 8 од супстанцијата откриена со високо чувствителен проток 9, чиј сигнал е снимен и обработен од микро-компјутер 11. Доколку е потребно, фракциите автоматски се избираат за време на врвната излез.

Звучниците за LFS се изведуваат од нерѓосувачки челик со внатрешен дијаметар од 2-6 мм и долги 10-25 см. Колоните се полни со сорбент (NF). Како NF, силика гел, алуминиум оксид или модифицирани сорбенти се користат. Силика гел обично е изменета со воведување на различни функционални групи во неговата површина.

Детектори. Регистрацијата на излез од колона од посебна компонента е направена со користење на детектор. За да се регистрирате, можете да користите промена во било кој аналитички сигнал што доаѓа од фазата на движење и поврзана со природата и количината на компонента на мешавината. Во течна хроматографија, аналитички сигнали се користат како апсорпција на светлина или отпорност на светло на појдовниот раствор (фотометриски и флуориметриски детектори), индекс на рефракција (рефрактометриски детектори), потенцијална и електрична спроводливост (електрохемиски детектори) итн.

Континуирано детектабилен сигнал е снимен со рекордер. Hro-matogram е низа на детекторски сигнали генерирани од секвенцата на избраните компоненти на смесата. Во случај на одвојување на мешавината на надворешен хроматограм, се видливи посебни врвови. Позицијата на врвот на хромат-грам се користи за идентификација на супстанцијата, висината или врвната област - за целите на квантитативно определување.

Квалитативна анализа

Најважните карактеристики на хроматограмот - времето на задржување на TR и поврзаниот волумен поврзани со него - ја одразуваат природата на супстанциите, нивната способност за сонапција на материјалот на фиксната фаза и, според тоа, под постојаноста на условите за хроматографија се средства за идентификување на супстанцијата. За оваа колона со одреден проток и температурата, секое време на поврзување на секое соединение е постојано (слика 7.1.1.2), кадешто TR (A) е време на одржување на компонентата А од анализираната мешавина од моментот на влегување во моментот на влегување во моментот на влегување Колоната пред појавата на излезот од врвната максимална колона, 1K (Сонце) - Времето на задржување на внатрешниот стандард (супстанцијата првично е отсутен во анализираната мешавина), H е висина на врвот (mm), пепел - на Пик ширина на половина од својата висина, мм.

За да се идентификува супстанцијата од хроматограм, обично се користат стандардни примероци или чисти супстанции. Споредете го времето на држење на непозната компонента IR * со време на задржување на IRCT на познати супстанции. Но, посигурна идентификација за мерење на релативното време на задржување

Во исто време, познатата супстанција (внатрешен стандард) за првпат е воведена во колоната и се мери времето на нејзиното задржување TR (BC), тогаш хроматографскиот ски е одделен (хроматографија) како резултат на мешавината во која е внатрешниот стандард Пред-додадени. Релативното време на задржување е определено со формулата (7.1.1.1).

Квантитативна анализа

Основата на оваа анализа е зависноста на висината на врвот H или нејзината површина на количината на супстанција. За тесни врвови, подобро е да се измери H, за широка нејасна - S. Врвната површина се мери на различни начини: множење на висината на врвот (H) на неговата ширина (AI / 2), измерена на половина од нејзината висина (Слика 7.2.3); Планирано; Користење на интеграторот. Модерни хроматографи се опремени со електрични или електронски интегратори.

За да се утврди содржината на супстанции во примерокот, главно се користат три методи: методот на апсолутна дипломирање, начинот на внатрешна нормализација и методот на внатрешен стандард.

Методот на апсолутна диплома се заснова на прелиминарната определба на зависноста помеѓу износот на воведената супстанција и областа или висината на врвот на хроматограмот. Позната количина на смеса за дипломирање е воведена во хроматограмот и се одредува областа или висината на добиените врвови. Изгради графикон на зависноста на површината или висината на врвот од износот на воведената супстанција. Тестот е анализиран, областа или висината на врвот на утврдената компонента се мери и износот се пресметува врз основа на табелата за ладење.

Овој метод обезбедува информации само за релативната содржина на компонентата во смесата, но не дозволува да ја одреди својата апсолутна вредност.

Внатрешниот стандарден метод се заснова на споредбата на избраниот врв параметар на анализираната супстанција со истиот параметар на стандардната супстанција воведена во примерокот во познат износ. Добро познатиот број на таква стандардна супстанција се воведува во примерокот за тестирање, чиј врв е доста добро одделен од врвовите на компонентите на мешавината во студијата.

Во последните два методи, потребно е воведување на корективни коефициенти кои ја карактеризираат чувствителноста на детекторите кои се користат за анализираните супстанции. За различни видови на детектори и различни супстанции, коефициентот на чувствителност се определува експериментално.

Исто така се користи и во течна адсорпција хроматографија, исто така се користи анализата на фракциите на решенија со време на пуштањето на супстанцијата од колоната. Анализата може да се изврши со различни физичко-хемиски методи.

Течната адсорпција хроматографија се користи првенствено за одвојување на органските супстанции. Овој метод е многу успешно проучен со составот на нафта, јаглеводороди, ефикасно дели, транс-исомери, алкалоиди итн. Со помош на VLS, можете да дефинирате бои, органски киселини, амино киселини, шеќер, нечистотии на пестициди и хербициди, лековити супстанции и други загадувачи во прехранбените производи.

"Високо ефикасна течна хроматографија на загадувачи на природни и отпадни води"

Вовед

Поглавје 1. Основни концепти и класификација на методи на течна хроматографија

1.1 Опрема за течна хроматографија

Поглавје 2. Суштината на HPLC

2.1 Апликација

Поглавје 3. Примери за користење на HPLC во анализата на објектот амбиент

Поглавје 4. Опрема за HPLC

Литература

апликација

Вовед

Хроматографски методи Честопати се неопходни за идентификација и квантитативно определување на органски супстанции со слична структура. Во исто време, гас и високо ефикасна течна хроматографија се најшироко користени за рутински анализи на загадувачите на животната средина. Гасната хроматографска анализа на органските загадувачи во пиењето и отпадни води првата е заснована на употребата на колоните за ликвидација, а кварцните капиларни колони подоцна беа дистрибуирани. Внатрешниот дијаметар на капиларни колони обично е 0,20-0,75 мм, должината е 30-105 м. Оптимални резултати при анализата на загадувачите во водата најчесто се постигнуваат кога се користат капиларни колони со различна дебелина на филмот од метилфенилсилики со содржината на фенил групите 5 и 50%. Ранливото место на хроматографски техники со користење на капиларни звучници често станува систем за внесување на примерокот. Системите за влезни системи може да се поделат во две групи: универзална и селективна. Универзал вклучуваат влез системи со поделба и без флукс поделба, "ладно" влез во колона и испарување при програмирање температура. Во селективен влез, чистењето со средно апсење во стапица, анализа на пареа итн. Кога користите универзални влезни системи во колоната, целиот примерок е целосно пренесена, само одредена фракција се воведува со селективна инјекција. Резултатите добиени за време на селективниот влез се значително попрецизни, бидејќи фракцијата што падна во колоната содржи само испарливи супстанции, а техниката може да биде целосно автоматизирана.

Гас хроматографските детектори кои се користат при мониторингот на загадувачите често се поделени на универзална, одговарајќи на секоја компонента во подвижната фаза и селективна реактивна на присуството во подвижната фаза на одредена група супстанции со слични хемиски карактеристики. Универзал вклучуваат пламен-јонизација, атомска емисија, масовни спектрометриски детектори и инфрацрвена спектрометрија. Селективните детектори кои се користат во анализата на вода се електронски зафаќаат (селективни на супстанции кои содржат атоми на халогени), термички (селективни за соединенија кои содржат азотни и фосфорни и фосфорни (селективни до ароматични јаглеводороди), детектор за електролитски спроводливост (селективно до соединенија, кои содржат халоген сулфур и азотни атоми). Минимални откриени количини на супстанции - од нанограми до пикограми во секунда.

Високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) е идеален метод за утврдување на голем број термички нестабилни соединенија кои не можат да се анализираат со гасна хроматографија. Предметите на анализа со методот на хроматографија на течности во моментов се современи агрохемикалии, кои вклучуваат метакарбонати и фосфодорскински инсектициди, други не-испарливи супстанции. Високо ефикасна течна хроматографија станува се повеќе дистрибуирана меѓу другите методи што се користат во мониторингот на животната средина, исто така, бидејќи има брилијантни перспективи во однос на автоматизација на подготовката на мострата.

Поглавје 1. Основни концепти и класификација на методи на течна хроматографија

Течната хроматографија е поделена на неколку класи во зависност од видот на превозникот на стационарната фаза. Едноставниот хардверски дизајн на хартија и тенок слој хроматографија доведе до широко распространета употреба на овие методи во аналитичката практика. Сепак, големите можности за течна хроматографија на колоната го стимулираа подобрувањето на опремата за овој класичен метод и доведе до брзо воведување на HPLC. Донесувањето на елуент преку колона со висок притисок овозможи нагло зголемување на стапката на анализа и значително зголемување на ефикасноста на поделбата поради употребата на фини сорбент. Методот HPLC моментално овозможува да се идентификуваат, квантитативно анализираат комплексни мешавини на органски соединенија.

Според механизмот на интеракцијата на одвоената супстанција (елити) со фиксна фаза, се разликува адсорпција, дистрибуција, јонска размена, исклучување, јонски пар, размена на лиганд и афината хроматографија.

Адсорпција хроматографија . Поделбата со методот на адсорпција хроматографија се изведува како резултат на интеракцијата на одделена супстанција со адсорбентен, како што е алуминиум оксид или силика гел, кои имаат активни поларнски центри на површината. Растворувач (елуент) - не-поларна течност. Механизмот за сорпција се состои во одредена интеракција помеѓу поларната површина на сорбентата и поларната (или способна да ги поларизира) областите на молекулите на анализираната компонента (слика 1).

Сл. 1. Адсорпција флушка хроматографија.

Дистрибутивна хроматографија . Со дистрибутивната олицетворение на течна хроматографија, сепарацијата на мешавината на супстанции се врши поради разликата во нивните дистрибутивни коефициенти помеѓу двете неверојатни фази - елуент (подвижна фаза) и фазата лоцирана на сорбентата (фиксна фаза).

Зашто нормално фаза Варијантата на дистрибутивната флуидна хроматографија користи не-поларни елунт и поларни групи, пресадена на површината на сорбентата (најчесто силика гел). Како модификатори на површината на силика гел (фази на пресадена), се користат супституирани алкил хлоросилани, кои содржат поларни групи, како што се нитрил, амино група итн. (Слика 2). Употребата на фасани фази овозможува фино контрола на сорпција својства на површината на стационарната фаза и да се постигне висока ефикасност на поделба.

Сл. 2. Дистрибуција хроматографија со фаза на графт (нормална фаза опција).

Сл. 3. Дистрибутивна хроматографија со пресадена фаза (опција за обратна фаза).

Помалку широко користена варијанта на течна хроматографија со прикачени фази кога течната фиксна фаза се применува на фиксен превозник.

Ексклузивно (Хеликинг) Хроматографијата е варијанта на течна хроматографија, во која се појавува поделбата на супстанциите поради распределбата на молекулите помеѓу растворувачот во порите на сорбентата и растворувачот што тече меѓу нејзините честички.

Афинитет Хроматографијата се заснова на специфични интеракции на одделени протеини (антитела) со пресадена на површината на супстанциите со сртати (антигени смоли), селективно формирање комплекси (конјугати) со протеини.

Јонска размена, јонски пар, хроматографија на лиганд се користат главно во неорганска анализа.

Главните параметри на хроматографско сепарација.

Главните параметри на хроматографската поделба се задржаниот волумен и времето на задржување на компонентата на смесата (слика 4).

Holding Timet е време кое патувало од моментот на влегување во примерокот до колоната до максимумот на соодветниот врв не се пушти. Множење на времето на задржување на волуметриската брзина на елунт F, ние го добиваме задржаниот волумен на VR:

Поправено време на задржување е време што поминало од изгледот на максималната максимална компонента на Врвот на соодветното соединение:

tr "\u003d tr-t0 ;

Намалениот или коригираниот износ на задржување е износот на задржување со корекција на мртвиот волумен на колоната v0, т.е. на обемот на обемот на UNSTRED компонентата:

VR "\u003d VR-V0;

Карактеристиката за одржување е исто така коефициентот К ", дефиниран како сооднос на масата на супстанцијата во фиксната фаза на масата на супстанцијата во подвижната фаза: k" \u003d mn / MP;

Вредноста на K "е лесно да се одреди хроматограмот:

Најважните параметри на хроматографско одделување се неговата ефикасност и селективност.

Ефикасноста на колоната, измерена со висината на теоретските плочи (VETT) и обратно пропорционално со нив (n) е повисока од врвот на супстанцијата која се спушта во исто време за задржување. Вредноста на ефективноста може да се пресмета со хроматограмот според следната формула:

N \u003d 5.54. (Tr / 1/2) 2,

каде тр - Држење време,

w. 1/2 - изберете ширина на половина висина

Знаејќи го бројот на теоретски плочи во колоната, должината на колоната L и просечниот дијаметар на жито на сорбентата DC, лесно е да се добијат висинските вредности што е еквивалентни на теоретската плоча (VETT) и горната висина (Pvett):

VETT \u003d L / N Pvett \u003d Vett / d C

Овие карактеристики ви овозможуваат да ја споредите ефективноста на колоните од различни типови, да го оцените квалитетот на сорбент и квалитетот на колоните за полнење.

Изборот на поделба на две супстанции се одредува со равенката:

Кога размислувате за одвојување на мешавина од две компоненти, важен параметар исто така се служи од степенот на одвојување:

;

Врвовите се сметаат за дозволени ако РС е поголема или еднаква на 1,5.

Главните хроматографски параметри ја поврзува следната равенка за решавање:

;

Фактори кои го дефинираат селективноста на раздвојувањето се:

1) хемиската природа на сорбентата;

2) составот на растворувачот и неговите модификатори;

3) хемиската структура и својствата на компонентите на споделената мешавина;

4) температура на колоната

1.1 Опрема за течна хроматографија

Во модерната течна хроматографија, уредите користат различни степени на сложеност - од повеќето едноставни системи до висока класа хроматографи опремени со различни дополнителни уреди.

На Сл. 4. Презентиран блок дијаграм на течен хроматограф, кој го содржи минималниот потребен сет на компоненти, во еден или друг, присутен во било кој хроматографски систем.

Сл. 4. Блок дијаграм на течен хроматограф.

Пумпата (2) е дизајнирана да создаде постојан растворувач. Неговиот дизајн се одредува првенствено со работен притисок во системот. За работа во опсегот од 10-500 MPA, се користат пумпи за клипови (шприц) или клипот. Недостаток на првата е потребата за периодични запирања за пополнување на елуент, а втората е поголема сложеност на дизајнот и, како резултат на тоа, високата цена. За едноставни системи со ниски оперативни притисоци од 1-5 MPa, евтини перистални пумпи се успешно се користат, но бидејќи е тешко да се постигне постојаност на притисок и проток, нивната употреба е ограничена на подготвителни задачи.

Инјекторот (3) обезбедува примерок влез на мешавина на споделени компоненти во колона со доволно висока репродуктивност. Едноставни системи за внесување на примероци - "Стоп-проток" Потребна е пумпа запре и, според тоа, помалку погодно од грабежните диспензери развиени од Reodyne.

Колоните (4) за HPLC се дебели ѕидни цевки од нерѓосувачки челик кои можат да издржат висок притисок. Густината и униформноста на колоната на Зербент игра голема улога. За течна хроматографија со низок притисок, успешно се користат дебели стаклени колони. Температурната константа е обезбедена од термостатот (5).

Детекторите (6) за течна хроматографија имаат проток кафе, во која постои континуирано мерење на било кој имот на течењето елуент. Најпопуларните видови на детектори за општа намена се рефрактометри кои го мерат индексот на рефракција и спектрофотометриски детектори кои ја одредуваат оптичката густина на растворувачот на фиксна бранова должина (обично во ултравиолетовиот регион). Предностите на рефрактортерите (и недостатоците на спектрофотометри) треба да вклучуваат ниска чувствителност на видот на дефинираното соединение, кое не може да содржи хромофорски групи. Од друга страна, употребата на рефрактите е ограничена со изократски системи (со константен елуентен состав), така што употребата на растворувач градиент во овој случај не е можно.

Звучниците за HPLCs, кои најчесто се користат во анализата на загадувачите на животната средина, имаат должина од 25 см, а внатрешниот дијаметар од 4,6 мм е исполнет со сферични честички од големина на силика гел од 5-10 μm со пресадена октадецилна група. Внатре последните години Имаше колони со помал внатрешен дијаметар исполнет со помали честички. Употребата на таквите колони доведува до намалување на потрошувачката на растворувачи и времетраењето на анализата, зголемување на чувствителноста и ефикасноста на поделбата, а исто така го олеснува проблемот со поврзување на колоните на спектралните детектори. Колоните со внатрешен дијаметар од 3,1 мм се испорачуваат со безбедносен кертриџ (фалсификување) за да го зголемат животниот век и да се подобри репродуктивноста на анализите.

Како детектори во современи уреди за HPLC, UV детектор на диоди матрица, флуоресцентни и електрохемиски, обично се користат.

Треба да се има на ум дека во практична работа, поделбата честопати не е една по една, туку според неколку механизми во исто време. Така, сепарацијата за исклучување е комплицирана од адсорпционите ефекти, адсорпција - дистрибуција и обратно. Во исто време, повеќе разлики во супстанциите во примерокот според степенот на јонизација, основност или киселост, во молекуларната тежина, поларизираноста и другите параметри, толку е поголема веројатноста за други механизми за одвојување за такви супстанции.

Во пракса, "со кои се соочува" (дистрибуцијата) хроматографија, во која фиксната фаза не е Поларна, а преместувањето поларната (т.е., обратното на "директна фаза" хроматографија) е добиена во најголема дистрибуција.

Во повеќето лаборатории на светот, група од 16 приоритетни Паус се анализира со HPLC или CMS методи.

Поглавје 2. Суштината на HPLC

Во високо ефикасна течна хроматографија (HPLC), природата на процесите што се случуваат во хроматографската колона обично се идентични со процесите во гасна хроматографија. Разликата се состои само од употреба како фиксна фаза на течноста. Поради високата густина на фазите на движење на течноста и големиот отпор на колоните за гас и течна хроматографија, тие силно се разликуваат во хардверскиот дизајн.

Во HPLC, чистите растворувачи или нивни мешавини обично се користат како што се движат фази.

Да се \u200b\u200bсоздаде прилив на чисти растворувачи (или мешавини на растворувачи), повикана во течна хроматографија со елуент, користи пумпи вклучени во хидрауличниот хроматографски систем.

Адсорпционата хроматографија се изведува како резултат на интеракцијата на супстанцијата со адсорбенти, како што се силика гел или алуминиум оксид со активни центри на површината. Разликата во способноста за интеракција со адсорпциони центри со различни молекули на примерокот води кон нивно одвојување во зони во процесот на движење со подвижна фаза на колоната. Оваа поделба на компонентни зони зависи од интеракцијата, и со растворувач и адсорбент.

Најголемата употреба во HPLC се адсорбенти од силика гел со различни волумени, површински и пори дијаметар. Значително помалку често користат алуминиум оксид и други адсорбенти. Главната причина за ова:

Недоволна механичка сила која не дозволува пакување и употреба при покачени притисоци карактеристични за HPLC;

силика гел во споредба со алуминиум оксид има поширок спектар на порозност, површина и пори дијаметар; Значително големата каталитичка активност на алуминиум оксид доведува до нарушување на резултатите од анализата поради распаѓање на компонентите на примерокот или нивната неповратна хемороспекција.

Детектори за HPLC.

Високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) се користи за откривање на поларните нестабилни супстанции, што поради некоја причина не може да се преведе во форма погодна за гасна хроматографија, дури и во форма на деривати. Таквите супстанции, особено, вклучуваат сулфонски киселини, бои растворливи во вода и некои пестициди, како што се фенил деривати - уреа.

Детектори:

УВ - детектор на матрица со диоди. "Матрицата" на фотодиоди (нивни повеќе од двесте) постојано се регистрира сигнали во УВ и видливиот спектар област, со што се обезбедува WF-V-SPECTRA запис во режимот на скенирање. Ова ви овозможува постојано да се отстранувате со висока чувствителност неискажана спектрика брзо поминува низ специјална клеточна компонента.

Споредено со откривање на истата бранова должина, која не дава информации за "чистотата" на врвот, можноста за споредување на целосниот спектра на Diode Matrix обезбедува резултат на резултатот од идентификацијата со многу поголем степен на сигурност.

Флуоресцентна детектор. Големата популарност на флуоресцентни детектори се објаснува со многу висока селективност и чувствителност, а фактот што многу загадувачи на животната средина флуоресцерат (на пример, полирароматични јаглеводороди).

Електрохемискиот детектор се користи за откривање на супстанции кои лесно се оксидираат или обновуваат: феноли, меркапти, амини, ароматични нитро и халогени деривати, алдехиди кетони, бенцидини.

Хроматографско одделување на мешавината на колоната поради бавна промоција на ПФ трае долго време. За да се забрза хроматографскиот процес се изведува под притисок. Овој метод се нарекува сок-ефикасна течна хроматографија (LJ)

Модернизацијата на опремата што се користи во класичната лична колона хроматографија ја направи една од ветувачките и модерни методи за анализа. Високо ефикасна течна хроматографија е пригоден начин на одвојување, подготовка распределба и про-одржување и квантитативна анализа на не-испарливи термола-бели соединенија како мали, така и со голема молекуларна тежина.

Во зависност од видот на сорбенот што се користи во овој метод, се користат 2 опции за хроматографија: на поларниот сорбент со користење на не-поларна елунтска (директна фаза опција) и на не-поларна сорбена со поларната елунт - т.н. Фасе Високо ефикасна течна хроматографија (исклучена).

Кога елуент транзицијата кон елуент, рамнотежата под условите на навредта е инсталирана многу пати побрзо отколку во условите на поларните сорбенти и не-воден ПФ. Како последица на тоа, како и погодностите за работа со елумензи за вода и вода, OFVZH е добиен во моментов поголема популарност. Поголемиот дел од анализите се спроведуваат со помош на АРС.

Континуирано детектабилен сигнал е снимен со рекордер. Хроматограмот е рекордер снимен на снимката во инверзијата на сигналите на детекторот произведен со излегување од ко-лента на поединечните компоненти на смесата. Во случај на одвојување на мешавината на надворешен хроматограм, се видливи посебни врвови. Позицијата на врвот на хроматограмот се користи за идентификување на супстанцијата, висината или врвната област - за целите на квантитативно определување.

2.1 Апликација

Најраспространета употреба на HPLC наоѓа во следните области на хемиска анализа (се распределуваат анализи, каде што HPLC практично нема конкуренција):

· Контрола на квалитетот на квалитетот - адитиви за тонични и вкус, алдехиди, кетони, витамини, шеќер, бои, конзерванси, хормонални препарати, антибиотици, триазин, карбамати и други пестициди, микотоксини, нитрозомини, полициклични ароматични јаглеводороди итн.

· Заштита на животната средина - феноли, органски нитро соединенија, моно- и полициклични ароматични јаглеводороди, серија пестициди, главни анјони и катјони.

· Криминалистиката - лекови, органски експлозиви и бои, потентни фармацевтски препарати.

· Фармацевтска индустрија - стероидни хормони, речиси сите производи од органска синтеза, антибиотици, полимерни препарати, витамини, препарати од протеини.

· Медицински биохемиски и лековити супстанции и нивните метаболити во биолошки течности (амино киселини, пурини и пиримидини, стероидни хормони, липиди) во дијагностиката на болести, одредувајќи ја стапката на отстранување на лекови од телото за целите на нивната индивидуална доза .

· Земјоделство - Определување на нитрат и фосфат во почвите за да се одреди потребниот број на ѓубрива, одредување на хранливата вредност на добиточната храна (амино киселини и витамини), анализа на пестициди во почвата, водата и земјоделските производи.

· Биохемија, биоорганска хемија, генетско инженерство, биотехнологија - шеќер, липиди, стероиди, протеини, амино киселини, нуклеозиди и нивните деривати, витамини, пептиди, олигонуклеотиди, порфирини итн.

· Органска хемија - сите стабилни производи на органска синтеза, бои, термолабилни соединенија, нестабилни соединенија; неорганска хемија (Практично сите растворливи соединенија во форма на јони и сложени соединенија).

· Контрола на квалитет и безбедност на храна, алкохолни и безалкохолни пијалаци, вода за пиење, хемикалии за домаќинства, парфимерија во сите фази од нивното производство;

· Определување на природата на загадувањето на местото на техногени катастрофа или итност;

· Детекција и анализа на наркотични, потентни, отровни и експлозиви;

· Определување на присуството на штетни супстанции (полициклични и други ароматични јаглеводороди, феноли, пестициди, органски бои, тешки, алкални и алкални земски метални јони) во течни канали, емисии на воздух и претпријатија за цврст отпад и во живи организми;

· Следење на процесите на органска синтеза, нафта и јаглен, биохемиски и микробиолошки индустрии;

анализа на квалитетот на почвите за примена на ѓубрива, присуство на пестициди и хербициди во почвата, водата и производите, како и хранливата вредност на добиточната храна; Софистицирани истражувачки аналитички задачи; Добивање на микроколизмот на натчовечка супстанција.

Поглавје 3. Примери за користење на HPLC во анализата на објектите на животната средина

HPLC - метод за следење на PAU во објекти за заштита на животната средина

За полициклични ароматични јаглеводороди (ПАХ), екотоксикуните од првата класа на опасност се екстремно ниски нивоа на максимални дозволени концентрации (МПЦ) во природните објекти. Дефиницијата на ПАУ на ниво на ПДЦ и подолу се однесува на бројот на многу сложени аналитички задачи и високотехнолошки методи на анализа (GC-MS, GC, HPLC) се користат за нив. При изборот на метод за следење на главните карактеристики кои се разгледуваат - чувствителност и селективност, извоз и ефикасност се додаваат, бидејќи Мониторингот претпоставува сериска анализа. Варијанта на HPLC на кратки колони со мал дијаметар во голема мера одговара на наведените барања. Со користење на овој метод, авторите се развија и заверени од методите на контрола на Бенц [А] Пирено во три природни средини: аеросол, снежен покрив и површински води. За техники се карактеристични: едноставна Unified примерок подготовка, вклучувајќи и екстракција на PAH органски растворувачи и концентрација на екстракт, директна администрација на концентриран екстракт во хроматографска колона, употреба на мулти-бран фотометриска детекција во УВ спектар регионот, идентификација на PAH врвови на хроматограми со користење на два параметри, држење на време и спектрален став. Вкупната грешка не надминува 10% кога го определува Бенц [А] Пиренскиот во аеросолот во опсегот на концентрации од 0,3 до 450 ng / m 3, во површинските води во опсегот на концентрации од 10 до 1000 ng / l, во Снежна покривка во површинската густина се движи од 0,5 до 50 μg / m 2. За случај на истовремено определување на приоритет Паус (до 12 соединенија) и регистрацијата на нехомогените врвови на анализи предложи повторено одвојување на екстрактот со промена на селективноста на мобилната фаза, бранова должина на откривањето и температурата од колоната, земајќи ги предвид индивидуалните својства на ПАУ.

1 . Квалитет на амбиентниот воздух. Масовна концентрација на Бенц [А] Пирен. Методи за вршење мерења од HPLC. Сертификат за сертификација на MVI бр. 01-2000.

2 . Квалитетот на површината и прочистени отпадни води. Масовна концентрација на Бенц [А] Пирен. Методи за вршење мерења од HPLC. Сертификат за сертификација на MVI бр. 01-2001.

3 . Квалитет на снежно покритие. Масовна концентрација на Бенц [А] Пирен. Методи за вршење мерења од HPLC. Сертификат за сертификација MVI бр. 02-2001.

Отстранување на Aniline од водени решенија користејќи AlwalTeMMIC Обнова Обнова на тркалање бакар скала

Проблемот со отстранување на јаглеводороди од отпадни води е итна задача. Во многу хемиски, петрохемиски и други индустрии, се формираат анилин и неговите деривати, кои се токсични супстанции. Aniline е упориште, MPC - 0.1 mg / m 3. Анилин и неговите деривати се растворливи во вода, затоа не можат да се отстранат со гравитациони врнежи.

Еден од најдобри методи Третманот за отпадни води од органски загадувачи е употребата на неоргански и органски адсорбенти кои можат да се регенерираат (алуминозиликати, модифицирани глини, дрво, влакна итн.) И неспособни за регенерација (активиран јаглерод, макроопорозни полимерни материјали итн.).

Регенерираните адсорбенти можат да ги отстранат органските супстанции од различен поларитет од вода. Пребарувањето за ефективни адсорбенти е итна задача.

Овој извештај ги презентира резултатите од една студија од областа на примена на валани бакарни скали на ереванската кабелска постројка (OperoCZ) како анилин сорбенти.

Хроматографски студии беа спроведени на HPLC хроматограф / високо ефикасна течна хроматографија / системи (водите 486 - детектор, водите 600-тина - контролор, водите 626 - пумпа), на колона 250 x 4 mm исполнет со sorbent што ја проучувале, брзина на мобилна фаза 1 ml / m / мобилна фаза Растворувачите се изучуваат од нас /, детектор - УВ-254. УВ спектроскопска анализа беше спроведена на спектрофотометар "Спед-50", спектарот се добиени со користење компјутерска програма Аспект плус.

Прецизно суспендирани делови од сорбенти беа воведени во одредени количини на анилин во вода, чии почетни концентрации беа различни. Смесата беше темелно потресена 6 часа. Следно, примерокот беше оставен за мил. Адсорпцијата е завршена за речиси 48 часа. Износот на преципитарен анилин е определен од УВ спектрофотометриски, како и рефрактометриска анализа.

Првично, адсорпционите својства на opekercz биле испитани кога енимно отстранување од решение во тетрахлорометан. Се покажа дека анилинот најдобро се апсорбира сорбента 3 (табела).

Мерењата беа спроведени и за Aniline водени раствори во концентрации од 0,01- 0,0001 MOL / L. Табелата ги прикажува податоците од 0,01 m решение.

Апсорпција на Анилина од различни сорбенти од 0,01 м воден раствор Анилина на 20 ° С

Претходно е утврдено дека адсорпцијата во наведените граници на концентрација се зголемува и линеарно зависи од индексот на рефракција. Износот на анилин е одреден од графичката зависност "рефрактивен индекс - моларна концентрација" и прилагодена од податоците од течната хроматографија и УВ спектрална анализа.

Најактивниот за водени решенија е сорбент 3. Износот на адсорбираниот загадувач беше пресметан како разлика помеѓу вкупниот број на загадувачки супстанции додадени на првичното решение и неговиот остаток во конечниот раствор.

Методи за одредување на ПАУ во објектите за заштита на животната средина

Како по правило, методите за гас хроматографија (GC) и високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) се користат за одредување на ПАУ. Поделбата на главните 16 pahs доволни за квантитативна анализа се постигнува со употреба или капиларни колони во гасна хроматографија или високо ефикасни колони што се користат во HPLC. Мора да се запомни дека колоната која ги споделува мешавините на калибрација од шеснаесет ПАХ не осигурува дека тие исто така ќе бидат добро одделени против позадината на истовремените органски соединенија во примероците од тестот.

Со цел да се поедностави анализата, како и да се постигне висок квалитет на добиените резултати, повеќето аналитички процедури се состои од чекор од пред-селекција (сепарација) PAU меѓу другите групи на истовремени соединенија во примероци. Најчесто, за оваа намена, методите на течна хроматографија со низок притисок во системот на течно-цврсто тело или течност со течност со помош на адсорпциони механизми, на пример, користејќи силика гел или алуминиум оксид, понекогаш се користат мешани механизми, како што се адсорпција и исклучоци со помош на Дехекс.

Користењето на претходно чистење на примероци ви овозможува да избегнете влијание при одредувањето на PAU:

Целосно не-поларни соединенија, како што се алифатични јаглеводороди;

Умерено и силно поларни соединенија, на пример, фталанци, феноли, полиолошки алкохоли, киселини;

Високи молекуларни соединенија како што се, на пример, смола.

Во високо ефикасна течна хроматографија (HPLC), главно се користат два вида детектори: флуориметриски детектор или спектрофотометриски детектор со фотодиодна линија. Границата за откривање на PAU со флуориметриска детекција е многу ниско, што го прави овој метод особено погоден за одредување на траги од полиријаматските соединенија. Сепак, класичните флуориметриски детектори практично не обезбедуваат информации за структурата на соединението во студијата. Современите дизајни овозможуваат да се регистрира флуоресцентното спектри, кои се карактеристични за поединечни соединенија, но сé уште не биле широко распространети во практиката на рутински мерења. Спектрофотометрискиот детектор со фотодиодна линија (FDL) овозможува регистрирање на спектарот на апсорпција во УВ и видлив спектрален опсег, овие спектри може да се користат за идентификација. Слични информации може да се добијат со користење на брзи дескриптивни детектори.

При изборот на аналитичка опрема наменета за одвојување, рече идентификацијата и квантитативната анализа на ПАУ, мора да се земат предвид следните услови:

Нивото на утврдената содржина во примероците од тестот;

Бројот на истовремени супстанции;

Аналитичката постапка се применува (методологија за мерење);

Можности за сериска опрема.

Развој на методот на одредување на алкални земни елементи и магнезиум со јонска висока ефикасна течна хроматографија

Развој и подобрување на методите кои ја решаваат анализата на анализата на анализата на аналитичката хемија базирана на водата. Развојот на високо ефикасна течна хроматографија со висок притисок го стимулираше развојот на нова насока во јонската размена на хроматографија на таканаречената јонска хроматографија. Синтезата на сорбети за јонска хроматографија е тешка, бидејќи е претставена доста барања. Поради отсуство на комерцијално достапни високо ефикасни катити, се користеше динамичка модифицирана фаза, за што модификаторот беше синтетизиран: n-хексадил-n-деанил-параминоиди-флуилаксалфонски киселини од етил диизопропиламониум (dgdask), каде што хидрофобичниот амин кој го содржи Значи група -, способна за размена на катјони. По донесувањето на решението за модификатор, апсорпцијата на L \u003d 260 Nm достигна 6,4 единици на оптичка густина (° E) со пауза на платото. Пресметаниот контејнер за размената на ION е 15,65 μmol. Бидејќи катлите на алкални земни елементи и магнезиум не се апсорбираат во спектарот УВ регионот, индиректна UV детекција се користи со синтетизирана УВ апсорбирачки елуент 1,4-dipyrididiumbutan bromide (dpb bromide). Бидејќи халогените јони ги уништуваат челичните делови на колоната, бромидот јон од 1,4-дипиридиумбутан беше заменет со ацетат јон. При миењето на колоната, елуентот се заменува со спротивставување на модификатор-етилдисопропиламониум на УВ апсорбираниот јон од 1,4-дипиридиумбутан. Поделбата на катките беше спроведена на оптимална бранова должина L \u003d 260 Nm на скала од 0,4 а во режимот "Преклопен скала"; Поларитетот на рекордерот беше променет на спротивното. Поделбата на сите изучувани катјони се постигнува во спроведувањето на адитиви за формирање комплекси. Ограничувањата за откривање Mg 2+, CA2+, SR2+, BA 2+ се 8 μg / L; 16 μg / l; 34 μg / l; 72 μg / l, соодветно. Во избраните услови, се анализира содржината на одмрпата, содржината на CA2+ во која е 10,6 +1.9 Mg-јон / L, Mg 2+ -2.5 + Mg-on / L, се анализира. Грешка во репродуктивноста не надминува за CA2+ -2,2%, за Mg 2+ - 1,4%.

Анализа на кадмиумски комплекси во животната средина

За проучување на механизмите за миграција на тешки метали во биосферата, се потребни податоци за хемиските форми на постоење на метали во природата. Тешкотиите во анализата на соединенијата на еден од најтоксичните метали - кадмиум - се поврзани со фактот дека ги формира кревките комплекси, а природната рамнотежа е искривена кога се обидува да ги разликува. Во оваа операција, кадмиумските соединенија во почвата и растенијата се изучуваат со помош на методологија врз основа на хроматографска поделба на екстракти, проследени со идентификација на компонентите со методите на хемиска анализа. Овој пристап го овозможи не само да се идентификуваат хемиските форми на кадмиум, туку и да ја пронајдат нивната трансформација во еколошките објекти.

Кадмиумот во објектите на биосферата е координирана од групата јаглени хидрати и полифеноли (вклучувајќи флавоноиди), C \u003d O, фосфати, NH 2, NO 2, SH-Group. За целите на оваа студија, се собрани сет модел лиганди кои ги претставуваат овие класи на соединенија. Интеракцијата на моделските лиганди со кадмиумски соли растворливи во вода беше испитана со методите на УВ спектроскопија и HPLC.

За ослободување на кадмиумските соединенија, екстракцијата беше корисна специјално избрана (не формира комплекси со растворувачи на ЦД-а). Значи, можно е да се оддели кадмиумот од сите тешки метали, покрај блискиот хемиски аналог - цинк. Кадмиум и цинк кои содржат врвови на хроматограми на добиените извадоци беа откриени со користење на метали како нивни дистиизатони. За одвојување од цинк, се користеше разликата во стабилноста на CD и ZN комплексите на pH 6-8. Избраните CD соединенија беа идентификувани со HPLC со промена на pH за време на процесот на елуција. Беа спроведени анализа на кадмиум соединенија со компоненти на почвата и растителни ткива, како и идентификува супстанции произведени од растенијата како одговор на зголемувањето на приемот на кадмиум од почвата. Се покажа дека житариците ги штитат агенсите се флавоноиди, особено Трицин, во мешунките - алкокси деривати на цистеин, во крвтари - и полифеноли и тиоли.

Поглавје 4. Опрема за HPLC

Sensia. Acta.

Новиот течен хроматограф за актации U-ефикасен е дизајниран да работи во најширокиот спектар на поплави и притисоци, обезбедувајќи како типична HPLC поделба на конвенционалните колони и ултра-брзо и ефикасно одвојување на колоните со сорбена големина на честички со помала од 2 микрони со ултра -Изберете притисоци (повеќе од 1000 банкомат).

Системот вклучува централна пумпа за централна пумпа која може да создаде притисок над 1000 банкомат и со задоцнување волумен од само 65 μl, обезбедувајќи високо-брзински хроматографски поделби. Avosampler. Acta. Тој е способен да работи во циклусот на инјектирање на примерокот 30 секунди и обезбедува највисока репродуктивност на влезот. Детектор на диоди-матрикс Акта PDA. Со минимизиран проток (2 μl) оптимизиран за режим на со голема брзина на хроматографија, ја користи патентираната технологија за осветлување и обезбедува зачувување на симетричната форма на врвовите што употребата на беспрекорен хроматографски систем и колони.

Системот е идеално поврзан со масовни спектрометри за да создаде најмоќни и најдобри системи за HPLC / MS.

Звучници за решенија во ултрахизи-ефикасна хроматографија со големина на жито 1.9 микрони се достапни од термо електрони за сите апликации

Sensia. TSP.

Модуларниот принцип на градежни HPLC уреди им овозможува на клиентот флексибилно опремување на опремата за решавање на сите аналитички задачи, и кога тие се менуваат, тоа е празно и економски модифицирано. Широкиот избор на модули вклучува пумпи - од изобличен до четирикомпонентен градиент, од микроколон до полу-скапоцени, сите достапни детектори, примерочни влезни системи - од рачни инјектори до Autosamplelays со можност за какви било манипулации на примероци, моќен софтвер за процесирање на резултатите од мерењето и контрола на сите системски модули. Сите модули се сертифицирани од CSA, TUF / GS, FCC (EMI), VDE (EMI), ISO-9000, тие се компактни, поседуваат модерен дизајн, лесен за управување, опремени со вграден екран и само-дијагностички систем , ви овозможуваат да креирате и зачувате во меморијата. Параметри за задачи. Тие одговараат на критериумите на "примерна лабораториска пракса" (GLP) и се наведени во регистарот на мерни фондови на Руската Федерација. Протоколите за мерење се издаваат во согласност со фармаковите на Англија, САД, Германија и Франција.

TSP модуларните системи се одликува со највисока сигурност и отпорност на работење.

Комбинацијата на модули обезбедува аналитика со сите предности на интегралниот систем, од една страна, и флексибилноста на модуларниот систем од друга страна. Во кое било поле на користење на високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) -фармакологија, биотехнологија, анализа на објектите на животната средина, клиничката анализа, анализа на храна и пијалаци, анализа на петрохемиски и хемиски производи - овој уред не се користи, секогаш е оптимално конфигуриран да ги примени највисоките барања.

И двете истражувачки и високи перформанси рутински системи обезбедуваат:

Високо ефикасен растворувач дегасинг

Способност за работа со мали и супермарински количини на примерокот

Највисоката чувствителност, и со УВ / тип на детектор, и со диоди матрица (со познатата технологија за осветлување со оптички пат должина од 1 или 5 см по избор)

Работа со различни колони

Највисока точност на квантитативната анализа

Способност за автоматско работење со различни обем на примероци

RMS грешка во времето на задржување помалку од 0,3%

Минималната работна површина окупирана од системот

Највисока сигурност и стабилност на параметрите.

Истражувач LC пумпа. - HPLC пумпа, која има најдобри стапки на репродуктивност на репродуктивните времиња меѓу сите четирикомпоненти на пумпи со четири компоненти достапни во светот. Интегрираниот четири-канален вакуум дегсер и пулсирачки амортизери обезбедуваат одлична основна стабилност за да се постигне максимална чувствителност и точноста на квантитативната анализа.

Autorostator обезбедува највисоки перформанси и флексибилност на анализата. Широк избор на палети за примероци - од стандардни прозорци до 96- и 384-и микропластин - ги опфаќа потребите на речиси сите апликации. Новата технологија го обезбедува влезот на примерокот речиси без загуби, речиси 5 μl мострата е воведен од автозјер од вкупната големина на примерокот од 5 μl.

Геодети.

УВ / тип детектор и PDA (детектор со диоди матрица)

Истражувач УВ / Вис - Детектор на ultraviolet и видлива светлина со променлива бранова должина е комбинација на ефикасност и сигурност со највисока чувствителност на технологијата на Lightpipe. Широкиот избор на течен Cuvette го прави овој детектор универзален за сите апликации од оние кои користат капиларна или микроколонска хроматографија на полу-препарат и препарат.

Истражувач PDA. Детекторот е најчувствителен кај сите детектори на HPLC со помош на матрица со диоди. Оптиката со извор на два сочини дисективно ја покрива целата бранова должина од 190 до 800 nm. Формиторот на оптички влакна на светлината обезбедува одлична оптичка резолуција без жртвување на чувствителност.

Истражувач РИ. Рефрактометриски детектор со термостапувачка кафеана со минимален волумен со целосна електронска контрола од компјутерот.

Геодети. Флуориметричен скенирање детектор со највисока чувствителност и можност за откривање со флуоресценција, хемилуминисценција и фосфоресценција.

Широкиот избор на Autosamplers ви овозможува да работите со обични VIAS и 96-позиционирани плочи широко користени во биохемијата и клиничката пракса. Работата со нив е олеснета со примена на слични таблети за да се подготват примероци со солидна фаза екстракција.

400 електричен погон, Валко јамка (20 μl - стандард) со можност за делумно полнење.

Кариел 96 примероци.

Електричен погон, термостат звучници, Valco Load (100 μl - стандард) со делумно пополнување. Automix е достапен за подготовка на примероци. Примерок рингишпил: 84 x 2 ml (примероци) + Zh 10 ml (реагенси). Вграден термостат со звучници. 420

Autosampler Autosampler за истражувачки работи со можност за работа во режимите на целосна, делумно полнење и влез на микролитонски примероци. Широк избор на карусели (стандардни - 96 примероци).

Таблет Auto Simpter за работа со 96- и 384-позиции плочи. Влегувајќи во примерокот во јамка за притисок, можноста за внесување примероци е помала од 1 μl. Способност да се инсталира фидер на таблетот. HPLC.

Главни производители на опрема за HPLC

· Водите - супер-ротирачка хроматографија, масовна спектрометрија, колони, екстракција со цврста фаза;

· Варијан, Inc. - хроматографи и колони, додатоци за екстракција со цврста фаза;

· Агилентни технологии - хроматографи и колони;

· Хиперсел - колони и сорбенти.

· Мерк KGAA - TLC плочи и додатоци за TLC, звучници, сорбанти кои се движат фази за HPLC, додатоци за солидна фаза екстракција

· Dionex - опрема и колони за HPLC, особено за јонска хроматографија.

Литература

1.Pilipenko a.t., pyatnitsky i.v. Аналитичка хемија. Во две книги: kn..1 - m.: Хемија, 1990, -480s.

1. Pilipenko a.t., pyatnitsky i.v. Аналитичка хемија. Во две книги: kn..2 - м.: Хемија, 1990, -480s.

2. Vasilєv V.P. Аналитичка хемија. Во 2 TSP. 2. Физички - хемиски методи на анализа: студии. За Хико - Технол. специјалист. Универзитети. - М.: повисоко. Шк., 1989. - 384C.

3. Хидрохемиски материјали. Том 100. Методи и технички средства за оперативен мониторинг на квалитетот на површинските води. L.: Hydrometeo-Edition, 1991. - 200C.

4. luriate yu.yu. Аналитичка хемија на индустриски отпадни води / yu.yu. Лури; М.: Хемија, 1984. - 448С.

5. Yingg G. Инструментални методи на хемиска анализа / транс. од англиски М: МИР, 1989. - 348 стр.

6. Gorelik D.O., Konopelko L.a., Pankov E.D. Мониторинг на животната средина. Во 2 тони. Санкт Петербург: Chrismas. 2000. - 260 с.

7. Aivazov B.V. Вовед во хроматографија. М: повисоко. Шк., 1983. - 450 с.

8. Голдберг К.А., Вигдергауз М.С. Вовед во гасна хроматографија. М.: Хемија, 1990. - 329 стр.

9. Столјаров Б.В. et al. // Практичен гас и течна хроматографија. Санкт Петербург: СПБУ, 1998. - Стр. 81.

11. Gorshkov .g., Манаит I.I. HPLC - метод за следење на PAU во објекти за заштита на животната средина

12. Торосјан Г. О. Мартиросјан В. А., Алексанјан А. Р.

13. L.a. Турнуна, Г.Н. Кралицата за развој на техника за одредување на алкални земски елементи и магнезиум со јонска висока ефикасност течна хроматографија

14. DULZHEVA G.G., Dubtsova yu.yu., skubnevskaya g.i. Анализа на кадмиумски комплекси во животната средина

апликација

Определување на klomazone во водни хроматографски методи

Методички инструкции на Мук 4.1.1415-03

1. Подготвени: Федерални научен центар хигиена нив. F.F.

Erisman; Москва земјоделска академија. К.А.

Timiryazeva; Со учество на Одделот за Gosanapidnadzor на Министерството за здравство на Русија. Програмерите на методот се индицирани на крајот.

3. Одобрено од главниот државен санитарен лекар

На Руската Федерација, првиот заменик-министер за здравство на Руската Федерација, Акад. RAMS G.G. Onishchenko на 24 јуни 2003 година

5. Внесени за прв пат.

1. Воведниот дел

Производител: FMS (САД).

Трговско име: команда.

Активност: Кломасон.

2- (2-хлоробензил) -4,4-диметил-3-izoxalidine-3-еден (Jupak)

Светло-кафена вискозна течност.

Точка на топење: 25 -С.

Точка за вриење: 275-C.

Притисок притисок на 25-C: 19.2 MPa.

Коефициент на дистрибуција H-Octanol / Water: K LOGP \u003d 2.5.

Добро растворлив во ацетон, хексан, етанол, метанол,

хлороформ, дихлорометан и ацетонитрил; Растворливост во вода -

1.10 g / коцка. ДМ. Стабилен на собна температура најмалку 2 години, на 50 -С - најмалку 3 месеци.

Кратка токсиколошка карактеристика: орална орална

токсичност (LD) за стаорци - 1369 - 2077 mg / kg; Акутна дермална

токсичност (LD) за стаорци - повеќе од 2000 mg / kg; Акутна

инхалација Токсичност (LC) за стаорци - 4.8 mg / кубни метри. dm (4 часа).

Хигиенски стандарди. MPC во вода - 0.02 mg / кубни метри. ДМ.

Опсег на лекот. Кламазазон - избори Хербицид се користи за борба против житни и дикотиледарски растенија во соја и оризови култури за време на доверителите или претходно појавување.

2. Методи за одредување на klomazone во вода

хроматографски методи

2.1. Основни одредби

2.1.1. Принцип на техники

Техниката се базира на екстракција на klomakone од анализираниот примерок хексан, концентрацијата на екстрактот и последователната квантитативна определба со алтернативни методи:

високо ефикасна течна хроматографија (HPLC) со

ултравиолетовиот детектор, хроматографија со гас-течна хроматографија (GLC) со детектор за постојана стапка на рекомбинација или тенкослојна хроматографија (TLC). Квантитативното определување се врши со методот на апсолутен калибрација.

2.1.2. Селективност на методот

Во предложените услови, методот е специфичен во присуство на глобални загадувачи на животната средина: хлорофалзирани циклопезини (HCCG изомери), соединенија со дифенил серија (ДДТ и нејзините деривати), нивните метаболити - полихлорирани бензени и феноли, како и во присуство на натриум Trichlorotate, кој може да се користи на култури во квалитетот на хербицид.

2.1.3. Метролошка карактеристика на методот (p \u003d 0,95)

Реагенси, решенија и материјали

Кломазон со содржината на селото. 99,8%

(ФМС, САД)

Азот, многу добар 9293-79

Амонијак вода, 25%, H Gost 1277-81

Ацетон, h gost 2603-79

n-хексан, H Gost 2603-79

Водороден пероксид, 30% воден раствор ГОСТ 10929-77

Изопропил алкохол, HF TU 6-09-402-75

Сулфурна киселина, HF Gost 4203-77

Хлор хлороводородна киселина (сол), HF Gost 3118-77

Метил алкохол, hch gost

Натриум хидроксид, HF, 25% воден раствор ГОСТ 4323-77

Натриум сулфат безводен, HF Gost 1277-81

Сребрена нитрат, HF Gost 1277-81

2-феноксометан, H TU 6-09-3688-76

Хроматон N-AW-DMCs (0.16 - 0.20 мм)

со 5% se-30, Хеман, Чешка Република

Хроматонски N-AW-DMCs (0.16 - 0.20 мм) од 1,5

ОВ-17 + 1.95% QF-1, Хеман, Чешка Република

Плочи за Veth (СССР)

Плочи "Kizelgel 60 F-254" (FRG)

Плочи "Силфол" Република Чешка

Филтри за хартија "Белата лента", решен и претходно измиен со хексан ТУ 6-09-2678-77

2.3. Инструменти, опрема, јадења

Течен хроматограф Милхром

со ултравиолетова детектор

Хроматографски челик челик,

64 мм долг, внатрешен дијаметар од 2 мм,

пополнето 600 сребро, 5 микрони жито

Хроматографска гасна серија "боја" или

слично, опремени со постојан детектор

брзини на рекомбинација (DPR) со граница

детекција на линдана 4 x 10 g / коцка. цм

Хроматографско колоно стакло, должина

1 или 2 m, внатрешен дијаметар 2 - 3 мм

MSH-10 Микрофити, со капацитет од 10 μl tu 5e2-833-024

Апарат за тресење тип AVU-6C TU 64-1-2851-78

Бања Вода Ту 64-1-2850-76

Скали аналитички типови на VL-200 Gost 34104-80E

Камера хроматографски Gost 10565-74

GOST 10696-75 пумпа

Eriphet Mercut-Quartz тип Windows-11 TU 64-1-1618-77

Pulverizers Gost 10391-74.

Ротари вакуум испарувач IR-1M

или слични ТУ 25-11-917-76

Инсталација компресорот Ту 64-1-2985-78

Кабинет за сушење ТУ 64-1-1411-76

Funnels Divintory Gost 3613-75

Сурцијански колби, со капацитет од 100 ml Gost 1770-74

Се мери цилиндрите, со капацитет од 10, 50 ml Gost 1770-74E

Колби во облик на круша со мелење,

капацитет 100 ml Gost 10394-72

Конусни колби, со капацитет од 100 ml Gost 22524-77

Центри за центрифуга, Mermerics Gost 25336-82E

Пипети, со капацитет од 0,1, 1, 2, 5 и 10 ml Gost 20292-74

Хемиски канали, конусни, дијаметар

34 - 40 mm Gost 25336-82E

2.4. Избор на примерок.

Изборот, складирањето и подготовката на примероците се одржуваат во согласност со

"Унифицирани правила за земање примероци на земјоделски производи, прехранбени производи и објекти за заштита на животната средина за одредување на микроколизмот на пестициди" одобрени за n 2051-79 од 21.08.79

Избраните примероци можат да се чуваат во фрижидер не повеќе од 5 дена. Пред анализа на водата (со суспензија), филтрирани преку лабав филтер за хартија.

2.5. Подготовка за Дефиниција

2.5.1. HPLC метод

2.5.1.1. Подготовка на мобилната фаза за HPLC

Во мерната колба, капацитетот од 100 ml е поставен со пипета 5 ml изопанол и 5 ml метанол, тестиран на означениот хексан, се меша, филтрира.

2.5.1.2. Климатизација колона

Исплакнете го звучникот за HCOS со мешавина од хексан-метанол-изопропанол (90: 5: 5, по волумен) 30 минути. Со стапка на храна од 100 μl / мин.

2.5.2. Метод на GLC. Подготовка и климатизација колона

Завршената млазница (5% SE-30 на N-AW-DMCS Chromaton) заспива во стаклената колона, компактен под вакуум, колоната е инсталирана во термостат со хроматограф, без поврзување со детекторот и стабилизирање во азот струја на 250 -С за 10-12 часа

2.5.3. TSH метод

2.5.3.1. Подготовка на реагенси

2.5.3.1.1. Манифестирајќи реагенс n 1

1 g на сребро нитрат се раствора во 1 ml дестилирана вода, се додаваат 10 ml 2-феноксадетан, 190 ml ацетон, 1 - 2 капки хидроген пероксид се додаваат, решението се меша и пренесено на колбата од темно стакло.

2.5.3.2.2. Манифестирајќи реагенс n 2

0,5 g Silver Nitrate се раствора во 5 ml дестилирана вода во димензионална колба на 100 ml, се додава 10 ml од 25% воден амонијак, решението е прилагодено на 100 ml ацетон, предизвика и пренесено на колбата од темно стакло.

2.5.3.2. Подготовка на мобилната фаза за TLC

Во мерната колба со капацитет од 100 ml 20 ml ацетон е направен и хексан се додава на ознаката, се меша. Смесата се истура во хроматографска комора со слој од не повеќе од 6 до 8 мм за 30 минути. Пред почетокот на хроматографијата.

2.5.4. Подготовка на стандардни решенија

Главниот стандарден раствор на klomazone со содржина од 100 μg / ml е подготвен со растворање 0,010 g од лекот кој содржи 99,8% d., Во хексан во димензионална колба на 100 ml. Решението е зачувано во фрижидер во рок од еден месец.

Работни стандардни решенија со концентрација од 0,4; 1.0; 2.0; 4.0; 10.0; 20 и 40,0 μg / ml се подготвуваат од главниот стандард Кломакон раствор со соодветното секвенцијално разредување на хексан.

Работните решенија се складираат во фрижидерот не повеќе од еден месец.

2.5.5. Градење на графичка диплома

2.5.5.1. Графикон за дипломирање А (мерење од барањето 2.7.1, HPLC)

За да се изгради графикон за калибрација во инјекторот на хроматографот, 5 μl работен стандард Closalasson решение со концентрација од 4.0 се инјектира во инјекторот на хроматографот; 10.0; 20.0 и 40 μg / ml.

2.5.5.2. Графикон за дипломирање во (мерење од барањето 2.7.2, GLC)

Да се \u200b\u200bизгради графикон за дипломирање, 5 μl работен стандарден раствор на Clomazone со концентрација од 0,4 се инјектира на испарувачот на хроматографот. 1.0; 2.0; 4.0 и 10.0.

Врши најмалку 5 паралелни мерења. Пронајдете го просекот на висината на хроматографскиот врв за секоја концентрација. Графикот за калибрација (A или B) е изграден од зависноста на висината на хроматографскиот врв во ММ од концентрацијата на klomazone во растворот во МКГ / МЛ.

2.6. Дефиниција Опис

100 ml од анализираниот примерок на вода се става во сепаративна инка со капацитет од 250 ml, со капацитет од 25% воден раствор на натриум хидроксид, предизвика и додадете 20 ml n-хексан. Инката е потресена 3 минути, по одвојувањето на фазите, хексанскиот слој се исцеди во колба од круша со капацитет од 100 ml, пренесувајќи го преку слој од безводен натриум сулфат поставен во конусна инка на преклопен филтер за хартија . Отстранувањето на лекот од примерокот на вода се повторува двапати, користејќи 20 ml n-хексан. Комбинираниот екстракт од хексан испарува на ротирачки вакуум испарувач на температура од 40-C речиси до сувост, остатокот е разнесена со воздух или азот на одредена чистота. Сувиот остаток се раствора во 0.1 (HPLC, TLC) или 0,25 ml (GLC) на N-хексан и анализирани со еден од хроматографските методи.

2.7 Услови на хроматографија

Течен хроматограф со ултравиолетова детектор Милхром (Русија).

Челична колона 64 мм долга, внатрешен дијаметар од 2 мм,

пополнето 600 сребро, 5 микрони со жито.

Температура на колона: затворен.

Мобилна фаза: хексан-изопропанол метанол (90: 5: 5, по волумен).

Стапка на проток на елементи: 100 μl / мин.

Работна бранова должина: 240 nm.

Чувствителност: 0,4 единици. Апсорпција на скалата.

Износот на примерокот внесени: 5 μl.

Време на Claoscon: Околу 6 минути.

Линеарно откривање на опсег: 20-200 НГ.

Примероците кои даваат врвови се големи од стандардно решение со концентрација од 40 μg / ml, разредена со подвижна фаза за HPLC.

Хроматографски гас "Боја-570" со детектор за постојана стапка на рекомбинација на јони.

Стаклена колона 1 m долги, внатрешен дијаметар од 3 mm, исполнет со хроматонски N-AW-DMCs со 5% SE-30 (0.16 - 0.20 mm).

Електрометарска работна скала 64 x 10 10.

Брзината на движење на лентата на самоиспитување 200 mm / h.

Температура на колоната на термостат - 190-C

детектор - 300-C

испарувач - 220-C

Брзина на превозникот (азот) - 60 ml / мин.

Волуменот на внесениот примерок е 5 μl.

Клаусон излез време - 2,5 мин.

Линеарно откривање Опсег: 2 - 50 ng.

Примероците кои даваат врвови се големи од стандардно решение со концентрација од 10 μg / ml, разредена со хексан.

За да се зголеми точноста на идентификацијата на klomazone со заедничко присуство во примерокот на гама GHCG, со тесно време на задржување, klomazone се отстранува од примерокот со третман со концентрирана сулфурна киселина. Повторната анализа на примерокот ви овозможува да го утврдите придонесот на klomazone на примарниот хроматографски сигнал.

Hexane решение во колбата добиени според стр. 2.6 квантитативно

(или нејзиниот аликвен дел) се применуваат на Silfol хроматографски плочи, "Kizelgel 60f-254" или "плочи за вето". Стандардни решенија во износот што одговара на содржината на klomakone 1, 2, 5 и 10 μg се применуваат. Плочата се става во хроматографска комора која содржи мешавина од N-хексан-ацетон (4: 1, по волумен). По развојот на хроматограмот, плочата се отстранува од Комората, го става под желба пред испарување на растворувачи, а потоа се третира со еден од развојот на реагенси и ставен под ултравиолетовата ламба 5 минути. Зоната на локализација на лекот на плочите "Silsufol", "плочи за Veth" и "Kiselgel 60f-254" се манифестира во форма на сиво-кафени точки со инфузија на RF 0,35, 0,85 и 0,43, соодветно. За да се одреди Кломакона, методите на TLC може да ги користат плочите "aluligrams" и "polygraphs" (frg производство). Вредноста на RIFL на klomazone на овие плочи е 0,37 и 0,38, соодветно.

3. Барања за безбедност

Општо земено прифатените безбедносни правила мора да се забележат при работа со органски растворувачи, токсични супстанции, електрични апарати за греење.

4. Следење на грешките за мерење

Оперативната контрола на грешката и репродуктивноста на мерењето се врши во согласност со препораките од 2335-95. GSI "Внатрешна контрола на квалитетот на квантитативните резултати од хемиската анализа".

5. Програмери

Јудина T.V., Fedorova N.e. (Ffcg нив. F.f. erisman).

Davidyuk E.i. (Ukrnieginoks, Киев); Kisenko MA, Demchenko V.F. (Институт за медицина на трудот А и АМН на Украина, Киев).